食道扁平上皮癌におけるFra-1下流遺伝子の網羅的検索

全面寻找食管鳞癌Fra-1下游基因

• 批准号: 26861062
• 负责人: 豊住 武司
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-26861062/
• 关键词: 食道扁平上皮癌; Fra-1; HMGA1; 転写因子; 予後

Fra-1はヒト正常線維芽細胞に過剰発現させると足場非依存的増殖能を獲得すると報告される。我々は食道扁平上皮癌(ESCC)検体を用いた検討で、Fra-1高発現が独立した予後不良因子であることを報告した(Cancer.2011;118)。今回Fra-1に調節される制御遺伝子を同定し、それら遺伝子の臨床病理学的意義を検討した。ESCC細胞株(TE10,TE11)においてsiRNA導入でFra-1をノックダウンし、遺伝子発現変化をマイクロアレイで網羅的に検索した。さらに遺伝情報学的手法であるBIOBASE upstream analysis(BIOBASE)で解析を加え、Fra-1制御遺伝子としてHMGA1(high mobility group protein AT-hook 1)を得た。Fra-1抗体(Santa Cruz,sc-28310x)、次世代シーケンサー(illumina,MiSeq)を用いたChIP-seqにおいて、ChIPサンプルではHMGA1プロモーター領域をコードするDNA断片が多数シーケンスされたが有意差は認めなかった。ChIP-PCRではChIPサンプルにおいて、HMGA1プロモーター領域を含むprimer配列でPCRがかかることを確認し、PCR産物のアガロースゲル泳動でも同様の結果を得た。TE10、TE11においてHMGA1発現をsiRNAでノックダウンし、増殖能、浸潤能、転移能のいずれもが抑制されることを確認した。当科で術前未治療に手術されたESCC検体135例を用いた検討では、HMGA1高発現群の予後は有意に悪く(p=0.0017)、多変量解析においてHMGA1高発現が独立した予後不良因子であった。Fra-1の制御遺伝子としてHMGA1を同定した。HMGA1発現はESCCの予後と深く関連し、ESCC治療に対する新たなターゲットとなり得ると考えた。

Fra-1 ヒト normal line germ cells に excessive occurrence させると foot non-dependent proliferation capacity を obtained すると report される. I 々 は esophageal squamous cell carcinoma (ESCC) 検 body を with い た beg で 検, Fra - 1 high 発 が now independent し た to adverse factor after で あ る こ と を report し た (Cancer. 2011; 118). This time, the significance of Fra-1に regulating される in the treatment of 伝 and を in the clinical pathology of 伝 and それら 伝 is discussed を検. ESCC cell lines (TE10, TE11) に お い て siRNA import で Fra - 1 を ノ ッ ク ダ ウ ン し, but 伝 発 son now - を マ イ ク ロ ア レ イ で snare of に 検 cable し た. Technique of information science さ ら に heritage 伝 で あ る BIOBASE upstream analysis (BIOBASE) analytical を で え, Fra - 1 royal heritage 伝 son と し て HMGA1 (high mobility group protein AT - hook 1) を た. Fra-1 antibody (Santa Cruz, sc - 28310 - x), the second generation シ ー ケ ン サ ー (illumina, MiSeq) を い た ChIP - seq に お い て, ChIP サ ン プ ル で は HMGA1 プ ロ モ ー タ ー field を コ ー ド す る DNA fragment が most シ ー ケ ン ス さ れ た が deliberately bad は recognize め な か っ た. ChIP - PCR で は ChIP サ ン プ ル に お い て, HMGA1 プ ロ モ ー タ ー field contains を む で PCR primer with column が か か る こ と を confirm の し, PCR products ア ガ ロ ー ス ゲ ル swimming で も with others in the result of の を た. TE10 and TE11 に お い て HMGA1 発 now を siRNA で ノ ッ ク ダ ウ ン し, raised colonization can, can infiltrate, planning can move の い ず れ も が inhibit さ れ る こ と を confirm し た. When families で preoperative treatment に surgery さ れ た ESCC 検 body 135 cases を with い た beg で 検 は, high HMGA1 発 now after the group of の to は intentionally に 悪 く (p = 0.0017), and many variations parsing に お い て HMGA1 high 発 が now independent し た to adverse factor after で あ っ た. Fra-1 imperial Legacy 伝 son と て てHMGA1を same standard た た. HMGA1 発 は now ESCC の to と after deep く masato even し, ESCC に す seaborne る new た な タ ー ゲ ッ ト と な り must る と exam え た.

项目成果

食道扁平上皮癌におけるFra-1制御遺伝子の検索

寻找食管鳞状细胞癌中 Fra-1 调控基因

• 发表时间: 2014
• 作者: Shinichiro Hasegawa;Hidetoshi Eguchi;Hiroaki Nagano;Masamitsu Konno;Yoshito Tomimaru;Hiroshi Wada;Naoki Hama;Koichi Kawamoto;Shogo Kobayashi;Naohiro Nishida;Jun Koseki;Takenori Nishimura;Noriko Gotoh;Shouichi Ohno;Norikazu Yabuta;Hiroshi No;豊住 武司
• 通讯作者: 豊住 武司

A comprehensive screening of the regulatory genes of Fra-1 in esophageal squamous cell carcinoma.

食管鳞癌Fra-1调控基因的全面筛选

• 发表时间: 2014
• 作者: 中塚梨絵;高橋剛;原尚志;広田将司;宮崎安弘;黒川幸典;山崎誠;宮田博志;瀧口修司;森正樹;土岐祐一郎;林泰寛，高村博之，蒲田亮介，大畠慶直，中沼伸一，廣瀬淳史，柄田智也，岡本浩一，酒井清祥，木下淳，牧野勇，中村慶史，尾山勝信，井口雅史，中川原寿俊，宮下知治，田島秀浩，二宮致，伏田幸夫，太田哲生;Takeshi Toyozumi
• 通讯作者: Takeshi Toyozumi

A comprehensive screening of the Fra-1 regulatory genes in esophageal squamous cell carcinoma.

食管鳞癌Fra-1调控基因的全面筛查。

• 发表时间: 2014
• 作者: 中塚梨絵;高橋剛;原尚志;広田将司;宮崎安弘;黒川幸典;山崎誠;宮田博志;瀧口修司;森正樹;土岐祐一郎;林泰寛，高村博之，蒲田亮介，大畠慶直，中沼伸一，廣瀬淳史，柄田智也，岡本浩一，酒井清祥，木下淳，牧野勇，中村慶史，尾山勝信，井口雅史，中川原寿俊，宮下知治，田島秀浩，二宮致，伏田幸夫，太田哲生;Takeshi Toyozumi;豊住 武司
• 通讯作者: 豊住 武司