Japan-US Research Collaboration on the Development of a Novel Therapeutic Strategy Targeting the Cancer-Associated Collagen to Overcome Treatment-Resistant Cancer Phenotypes.

本研究はゲノム編集技術を基盤として作製したLH2-conditionalノックアウトマウス(LH2-cKO)をもとに、collagen cross-linkの質的・量的な変化の解析を行い、癌周囲のcollagen Highway & Barrier形成のメカニズムを解明し、またそれらを阻害または改変する物質の同定と臨床応用への検証を行うことで、癌の進展と薬剤耐性という癌治療の最重要課題の克服を目指す。癌転移機構の解明だけでなく治療薬についても検討することは臨床的にも社会的にも大きく貢献できるものと確信している。本年度の研究成果としては、LH2-cKOマウスの転写・スプライシング・タンパク質翻訳について各種解析法を用いてコントロールマウスと比較した。LH2-cKOマウスよりcollagenサンプルを抽出し、コントロールマウスと比較したcollagen cross-link解析を、世界で唯一無二のcollagen cross-linkに対する高精度定量解析および構造解析を行える世界的研究拠点である米国 North Carolina大学のYamauchi教授の研究室と共同で行った。解析については、研究協力者として米国 North Carolina大学のYamauchi教授の元へ派遣したポスドクと協力して進めている。さらに、月に1回定期ミーティングを開催しており、実験計画についての盛んな意見交換を行っている。また、マウス胚線維芽細胞(MEF)の樹立に成功しており、今後tamoxifenを作用させ、LH2-KO線維芽細胞を樹立する。さらに、LH2-KOマウスおよびコントロールマウスにB16F10細胞およびSq-1979細胞を左心室注射および大腿骨内注射によって移植し、担癌マウスの作製に成功した。

本研究はゲノム編集技術を基盤として作製したLH2-conditionalノックアウトマウス(LH2-cKO)をもとに、collagen cross-linkの質的・量的な変化の解析を行い、癌周囲のcollagen Highway & Barrier形成のメカニズムを解明し、またそれらを阻害または改変する物質の同定と臨床応用への検証を行うことで、癌の進展と薬剤耐性という癌治療の最重要課題の克服を目指す。癌転移機構の解明だけでなく治療薬についても検討することは臨床的にも社会的にも大きく貢献できるものと確信している。本年度の研究成果としては、LH2-cKOマウスの転写・スプライシング・タンパク質翻訳について各種解析法を用いてコントロールマウスと比較した。LH2-cKOマウスよりcollagenサンプルを抽出し、コントロールマウスと比較したcollagen cross-link解析を、世界で唯一無二のcollagen cross-linkに対する高精度定量解析および構造解析を行える世界的研究拠点である米国 North Carolina大学のYamauchi教授の研究室と共同で行った。解析については、研究協力者として米国 North Carolina大学のYamauchi教授の元へ派遣したポスドクと協力して進めている。さらに、月に1回定期ミーティングを開催しており、実験計画についての盛んな意見交換を行っている。また、マウス胚線維芽細胞(MEF)の樹立に成功しており、今後tamoxifenを作用させ、LH2-KO線維芽細胞を樹立する。さらに、LH2-KOマウスおよびコントロールマウスにB16F10細胞およびSq-1979細胞を左心室注射および大腿骨内注射によって移植し、担癌マウスの作製に成功した。