Mechanical regulation of the musculoskeletal system by tendons and ligaments

肌腱和韧带对肌肉骨骼系统的机械调节

• 批准号: 21KK0161
• 负责人: 宿南 知佐
• 金额: $ 12.15万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Fund for the Promotion of Joint International Research (Fostering Joint International Research (B))
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-10-07 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21KK0161/
• 关键词: Tenomodulin; Scleraxis; メカノバイオロジー; 腱・靱帯; 顎関節; 腱; 靱帯; 運動器

Scx欠失ホモマウス、ヘテロマウスと野生型の２週齢のアキレス腱から抽出したRNAを用いて、RNAseqによるトランスクリプトーム解析を行っている。メカノセンシングに関連する遺伝子群に着目して解析を行っており、定期的に開催しているドイツ側とのZoomミーティングによって結果を議論している。ドイツ側では、ヒトの真皮由来の線維芽細胞を用いた3Dオルガノイドモデルを構築し、Dexamethasone(Dex)の効果などを検討した。Dexは腱分化の促進には有効ではなく、高濃度ではオルガノイド形成に負の作用を示したが、未処理あるいは低濃度のDex処理を行ったオルガノイドの腱関連遺伝子の発現プロファイルは腱由来の細胞によって形成されたオルガノイドとほぼ同等であることを見出している。前年度に引き続き、新規の伸展刺激応答性エレメントを同定するために、マウスScx遺伝子とTnmd遺伝子の上流と下流を含むゲノム領域を分割し、minimal promoterを有するpGL4.23ベクター、あるいは、promoter lessのpGL4.10ベクターに組み込んでDual luciferase assayを行っている。これまでに、ScxCre KI;RosaTomatoマウスの解析で、生後、Scxが骨組織でも発現することが見出されているので、ScxGFPレポーターマウスの非脱灰骨切片を用いた免疫染色によって、Scxが骨のどのような部位のどのような細胞で発現しているかを解析した。Scx欠失による下顎骨の形態変化と筋肉などの軟組織の関係を調べるために、野生型マウスの新生仔をルゴール液に浸漬後にマイクロCTで撮影し、得られた画像を用いて、Amiraによる立体構築を行うシステムを確立した。

Scx owe lost ホ モ マ ウ ス, ヘ テ ロ マ ウ ス と wild-type の 2 weeks 齢 の ア キ レ ス tendon か ら spare し た RNA を with い て, RNAseq に よ る ト ラ ン ス ク リ プ ト ー ム parsing line を っ て い る. メ カ ノ セ ン シ ン グ に masato even す る heritage 伝 subgroup に with mesh し て parsing line を っ て お り, regular に push し て い る ド イ ツ side と の Zoom ミ ー テ ィ ン グ に よ っ て results を comment し て い る. ド イ ツ side で は, ヒ ト の leather origin の line d を bud cells with い た 3 d オ ル ガ ノ イ ド モ デ ル を constructing し, Dexamethasone (Dex) の unseen fruit な ど を beg し 検 た. Dex は の promote tendon differentiation に は have sharper で は な く, high concentration で は オ ル ガ ノ イ ド form に negative を の role し た が, not 処 あ る い は low concentration の Dex 処 Richard を line っ た オ ル ガ ノ イ ド の tendon masato even heritage 伝 son の 発 now プ ロ フ ァ イ ル は tendinous origin の cells に よ っ て form さ れ た オ ル ガ ノ イ ド と ほ ぼ equal で あ る こ と を see out Youdaoplaceholder0 て る. Before annual に lead き 続 き, new rules の 応 answer to stretch stimuli エ レ メ ン ト を with fixed す る た め に, マ ウ ス Scx heritage 伝 son と Tnmd heritage 伝 son の upper と obscene を containing む ゲ ノ ム を し segmentation, minimal promoter を have す る pGL4.23 ベ ク タ ー, あ る い は, promoter Less の pGL4.10 ベ ク タ ー に group み 込 ん で Dual luciferase assay を line っ て い る. Youdaoplaceholder3 れまでに, ScxCre KI; RosaTomato マ ウ ス の parsing で, after birth, Scx が bone で も 発 now す る こ と が shows さ れ て い る の で, ScxGFP レ ポ ー タ ー マ ウ ス の the ash from bone biopsy を with い た immune dyeing に よ っ て, Scx が bone の ど の よ う な parts の ど の よ う な cells で 発 now し て い る か を parsing し た. Scx owe lost に よ る jawbone の morphology variations と brawn な ど の soft tissue の masato is を adjustable べ る た め に, wild type マ ウ ス の newborn larvae を ル ゴ ー ル liquid に after dipping に マ イ ク ロ CT し で pinch of shade, and ら れ た portrait を with い て, Amira に よ る stereo line build を う シ ス テ ム を establish し た.

项目成果

【研究成果】iPS細胞から効率良く腱細胞を分化誘導する系を確立

[研究成果] 建立有效诱导iPS细胞分化肌腱细胞的系统

ビュルツブルグ大学(ドイツ)

维尔茨堡大学（德国）

軟骨細胞

软骨细胞

• 发表时间: 2023
• 期刊: 最新の骨粗鬆症学(第2版)
• 作者: 内部健太;余 昕怡;山家新勢;宿南知佐
• 通讯作者: 宿南知佐

腱・靭帯分化誘導システムにおけるシングルセル解析

肌腱/韧带分化诱导系统中的单细胞分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 吉本 由紀;上住 聡芳;上住 円;田中 かおり;余 昕怡;黒澤 珠希;山家 新勢;前原 一満;大川 恭行;外丸 祐介;宿南 知佐
• 通讯作者: 宿南 知佐

TnmdCreノックインマウスの作製とTnmd陽性細胞の系譜解析

TnmdCre 敲入小鼠的产生及 Tnmd 阳性细胞的谱系分析

• 发表时间: 2021
• 作者: 山家新勢;吉本由紀;樋口真之輔;味八木茂;宿南知佐
• 通讯作者: 宿南知佐