Studies on the production and cell surface expression of short-chain glycosylated proteins by lysosomal exocytosis

溶酶体胞吐作用产生短链糖基化蛋白及其细胞表面表达的研究

基本信息

  • 批准号:
    21K21346
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 36.86万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Fund for the Promotion of Joint International Research (Home-Returning Researcher Development Research)
  • 财政年份:
    2022
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2022-02-18 至 2025-03-31
  • 项目状态:
    未结题

项目摘要

本研究では、哺乳動物細胞において、マンノースが3残基以下からなるN結合型糖鎖(パウチマンノース糖鎖)がどのように形成され、細胞表面へ露出されるのかを明らかにすることを目的としている。まず、HEK293、THP1、HuH7細胞からパウチマンノースを有する糖ペプチドをグライコプロテオミクス解析で同定したところ、60%以上がリソソーム由来のタンパク質であった。HuH7細胞を用いて、リソソーム局在糖加水分解酵素であるHEXAやMAN2B1の遺伝子を欠損した細胞を作出した結果、これらの細胞では、リソソーム酵素上のパウチマンノース含有量が減少した。つぎに、パウチマンノースを認識する抗体であるMannitouを用いて、細胞表面のパウチマンノースを染色した。その結果、エンドサイトーシスの阻害剤、mTORの阻害剤、カルシウム・イオノフォアでMannitouによる細胞表面染色が増加した。一方で、リソソーム・エキソサイトーシスの阻害剤であるVacuolin-1ではMannitou染色が低下した。このことから、パウチマンノース糖鎖は、リソソームで形成され、カルシウム依存的なリソソーム・エキソサイトーシスを介して細胞表面に露出していることが示唆された。さらに、リソソームの代表的なタンパク質であるLAMP1の細胞表面発現が低下する変異細胞を遺伝学的スクリーニングにより濃縮し、その責任遺伝子候補を同定した。この候補遺伝子をHuH7でノックアウトすると、LAMP1の表面発現が半分程度に減少し、リソソーム酵素の培地中への分泌も低下したことから、リソソーム・エキソサイトーシスに部分的に欠損を生じていることが示唆された。ノックアウト細胞では、Mannitouによる細胞表面染色も低下した。現在、この遺伝子について解析を進めている。
This study で は, mammalian cells に お い て, マ ン ノ ー ス が under three residues か ら な る type N combined with sugar lock (パ ウ チ マ ン ノ ー ス sugar lock) が ど の よ う に form さ れ, cell surface へ show さ れ る の か を Ming ら か に す る こ と を purpose と し て い る. ま ず, HEK293, THP1, HuH7 cells か ら パ ウ チ マ ン ノ ー ス を have す る sugar ペ プ チ ド を グ ラ イ コ プ ロ テ オ ミ ク ス parsing で with fixed し た と こ ろ, more than 60% が リ ソ ソ ー ム origin の タ ン パ ク qualitative で あ っ た. HuH7 cells を using い て, リ ソ ソ ー ム bureau in sugar hydrolysis enzyme で あ る HEXA や MAN2B1 の heritage 伝 を son owe loss し を た cells make し た results, こ れ ら の cells で は, リ ソ ソ ー ム enzyme on の パ ウ チ マ ン ノ ー ス contains し が it can reduce the た. つ ぎ に, パ ウ チ マ ン ノ ー ス を know す る antibody で あ る Mannitou を with い て, cell surface の パ ウ チ マ ン ノ ー ス を dyeing し た. そ の results, エ ン ド サ イ ト ー シ ス の resistance against tonic, mTOR の resistance against tonic, カ ル シ ウ ム · イ オ ノ フ ォ ア で Mannitou に よ る cell surface dyeing が raised plus し た. Party で, リ ソ ソ ー ム · エ キ ソ サ イ ト ー シ ス の resistance against tonic で あ る Vacuolin - 1 で は Mannitou low dyeing が し た. こ の こ と か ら, パ ウ チ マ ン ノ ー ス lock は sugar, リ ソ ソ ー ム で form さ れ, カ ル シ ウ ム dependent な リ ソ ソ ー ム · エ キ ソ サ イ ト ー シ ス を interface し て cell surface に reveal し て い る こ と が in stopping さ れ た. さ ら に, リ ソ ソ ー ム の represent な タ ン パ ク qualitative で あ る LAMP1 の cell surface low 発 now が す る - traces of idioblasts を 伝 learn ス ク リ ー ニ ン グ に よ り concentration し, そ の responsibility heritage 伝 son alternate を with fixed し た. こ の alternate heritage 伝 son を HuH7 で ノ ッ ク ア ウ ト す る と, LAMP1 の surface 発 が now half a degree に reduce し, リ ソ ソ ー の ム enzyme in the petty へ の low secretory も し た こ と か ら, リ ソ ソ ー ム · エ キ ソ サ イ ト ー シ ス に part に owe loss を raw じ て い る こ と が in stopping さ れ た. The surface of ノッ アウト アウト cells で ノッ and Mannitouによる cells is stained with <s:1> and is substained with た. Now, the <s:1> cultural heritage 伝 sub-に に て て て is analyzed を into めて る る る.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
リソソーム・エキソサイトーシスによるパウチマンノース含有糖タンパク質の細胞表面露出機構
溶酶体胞吐作用暴露细胞表面含甘露糖的糖蛋白的机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小林 香苗;眞壁 明子;中島 悠;平岡 聡史;宮崎 征行;津田 美和子;澄田 智美;野牧 秀隆;布浦 拓郎;川口 慎介;藤田盛久
  • 通讯作者:
    藤田盛久
{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}

{{ item.title }}
  • 作者:
    {{ item.author }}

数据更新时间:{{ patent.updateTime }}

藤田 盛久其他文献

Glycolipid biosynthesis and GPI anchor biosynthesis
糖脂生物合成和 GPI 锚生物合成
  • DOI:
  • 发表时间:
    2014
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    イ ゴンヒ;藤田 盛久;村上 良子;神澤 範行;前田 裕輔;木下 タロウ;神澤 範行
  • 通讯作者:
    神澤 範行
ドリコールリン酸マンノース利用制限下におけるGPIアンカー生合成の制御機構
多甘醇磷酸甘露糖有限利用率下 GPI 锚定生物合成的控制机制
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    平田 哲也;藤田 盛久;神澤 範行;村上 良子;前田 裕輔;木下 タロウ
  • 通讯作者:
    木下 タロウ
GPIアンカー型タンパク質の遊離に関わる新規GPI切断酵素
新型 GPI 切割酶参与 GPI 锚定蛋白的释放
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Lee Gun Hee;藤田 盛久;村上 良子;神澤 範行;前田 裕輔;木下 タロウ
  • 通讯作者:
    木下 タロウ
ドリコールリン酸マンノースの利用制限下においてGPIマンノース転移酵素IIによる反応は律速である
在多醇磷酸甘露糖的可用性有限的情况下,GPI 甘露糖转移酶 II 的反应是限速的。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    平田 哲也;藤田 盛久;神澤 範行;村上 良子;前田 裕輔;木下 タロウ
  • 通讯作者:
    木下 タロウ
GPIアンカー生合成における脂質リモデリングのアルキル供与体の解明
阐明 GPI 锚生物合成中脂质重塑的烷基供体
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    神澤 範行;前田 裕輔;藤田 盛久;木下 タロウ
  • 通讯作者:
    木下 タロウ

藤田 盛久的其他文献

{{ item.title }}
{{ item.translation_title }}
  • DOI:
    {{ item.doi }}
  • 发表时间:
    {{ item.publish_year }}
  • 期刊:
  • 影响因子:
    {{ item.factor }}
  • 作者:
    {{ item.authors }}
  • 通讯作者:
    {{ item.author }}

{{ truncateString('藤田 盛久', 18)}}的其他基金

GPIアンカーによるタンパク質選別輸送の制御機構の解明
阐明GPI锚蛋白分选运输的控制机制
  • 批准号:
    23687017
  • 财政年份:
    2011
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
出芽酵母におけるGPIアンカータンパク質の品質管理機構に関する研究
酿酒酵母GPI锚定蛋白质量控制机制研究
  • 批准号:
    06J03875
  • 财政年份:
    2006
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows

相似海外基金

口腔癌細胞の酸性環境に関与するリソソーム膜の動態のイメージング解析
口腔癌细胞酸性环境中溶酶体膜动力学的成像分析
  • 批准号:
    24K13093
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
加齢黄斑変性におけるオートファゴソーム・リソソーム融合の解析による治療標的の探索
通过分析年龄相关性黄斑变性的自噬体-溶酶体融合来寻找治疗靶点
  • 批准号:
    24KJ1780
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
リソソームと小胞体とのコンタクトによりERファジーが作動する分子機構
溶酶体与内质网接触激活内质网自噬的分子机制
  • 批准号:
    24K09438
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
コンドロイチンによるリソソーム活性制御を介した老化抑制
通过软骨素控制溶酶体活性来抑制衰老
  • 批准号:
    24K09476
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
リソソーム局在性酵素の機能制御に基づく慢性炎症性疾患治療リード化合物の創出
基于溶酶体定位酶的功能调节创建用于治疗慢性炎症疾病的先导化合物
  • 批准号:
    24K01635
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
カルシウム結合蛋白質を介するリソソーム膜の損傷応答機構の分子基盤解明
阐明钙结合蛋白介导的溶酶体膜损伤反应机制的分子基础
  • 批准号:
    23K23568
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
グリア・リソソームによる神経可塑性誘導メカニズムの解明
阐明神经胶质和溶酶体诱导神经可塑性的机制
  • 批准号:
    24K18234
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
中分子化合物の細胞内輸送を決定づける新規エンドソーム/リソソーム膜透過機構の解明
阐明决定中分子化合物细胞内转运的新型内体/溶酶体膜渗透机制
  • 批准号:
    24K18338
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
筋肉リソソームの金属イオン蓄積による線虫の低温耐性の制御
通过肌肉溶酶体中金属离子积累控制秀丽隐杆线虫的耐冷性
  • 批准号:
    24KJ2171
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
リソソームによる選択的膜分解の分子機序の解明
阐明溶酶体选择性膜降解的分子机制
  • 批准号:
    24KJ0822
  • 财政年份:
    2024
  • 资助金额:
    $ 36.86万
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
{{ showInfoDetail.title }}

作者:{{ showInfoDetail.author }}

知道了