Investigation of microbiome-mediated controlling lipid metabolism on homeostasis in the eye

微生物组介导的控制脂质代谢对眼稳态的研究

• 批准号: 22KJ3143
• 负责人: 小川 護
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ3143/
• 关键词: 12/15-LOX; マイボーム腺; 結膜上皮細胞; 菌依存的な脂質代謝変化; コレステロール硫酸; 硫酸基転移酵素SULT; 脂質メタボローム解析; in vitroスクラッチアッセイ

菌依存的な眼球における12/15-Lipoxygenase (LOX)活性の変化を明らかにするため、抗生剤4剤カクテル投与マウス眼で12/15-LOXのmRNA発現を定量PCRにて評価した。以前より眼球のみでの検証は行っていたが、付属器である涙腺、マイボーム腺・結膜組織も測定したところ、眼球、マイボーム腺・結膜において抗生剤投与マウスにおいて12/15-LOX発現は野生型マウスと比較して有意に減少していた。菌依存的な12/15-LOXの発現変化は角膜だけでなく結膜やマイボーム腺を含めた眼表面の広範囲で起こることが分かった。眼球の脂質メタボローム解析を新たに四重極飛行時間型質量分析装置を用いて行ったところ、コレステロール硫酸が抗生剤投与マウス・無菌マウスにおいて野生型に比して有意に増加していた。さらに、眼球、涙腺、マイボーム腺・結膜組織において定量PCRで評価を行うと、代謝物産生酵素である硫酸基転移酵素sulfotransferase（SULT）が全ての組織において抗生剤投与マウスで野生型に比して有意に増加していた。また、眼球、涙腺、マイボーム腺・結膜組織において発現が高いSULTのサブタイプは異なっていた。いくつかのSULTはコレステロールを基質とすることが不明なため、オキュラーサーフェスにおける新規機能の発見が期待される。in vitroにおけるヒト培養角膜上皮細胞を用いて細胞培養及び創傷治癒モデルのスクラッチアッセイを確立した。これによりマウス組織とヒト培養細胞両者での創傷治癒評価や脂質化合物投与の検証が可能となった。

Expression of 12/15-Lipoxygenase (LOX) mRNA in bacteria-dependent ocular tissues was evaluated by quantitative PCR. In the past, the expression of LOX in the eyeball was reduced by 12/15-LOX when compared with wild type. The development of bacteria-dependent 12/15-LOX in the cornea and the ocular surface A new quadrupole time-of-flight mass analyzer for the analysis of lipids in the eyeball was developed. In addition, quantitative PCR was used to evaluate the activity of sulfatotransferase (SULT), a metabolism-producing enzyme, in all tissues. The eye, the gland, the conjunctiva, the tissue, the tissue, the tissue. The new function of SULT is expected. Corneal epithelial cells cultured in vitro and wound healing established Wound healing evaluation of tissue culture and lipid compound administration are possible.