卵母細胞－体細胞の相互シグナルによる卵胞の休眠と覚醒メカニズム

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哺乳類の卵母細胞の多くは卵巣中で休眠しており、活性化によって成長を開始する。卵母細胞と周囲の顆粒膜細胞は同時に活性化することから、細胞間相互作用の存在が想定される。本研究では、シングルセルトランスクリプトーム解析を利用して細胞間のコミュニケーションを推定し、活性化に寄与する分子メカニズムを明らかにすることを目的とした。これまでの成果を基に、顆粒膜細胞ではWNTシグナルの下流で卵母細胞の活性化に関わる機構が働いていると仮説をたてた。本年度の約三ヶ月間では、既に自身が取得済みのデータセットを利用して、７日齢のWNT抑制変異（Wls cKO）マウスとコントロールマウス由来の卵巣についてシングルセルトランスクリプトーム解析を進めた。それぞれのマウス系統卵巣の配列データに対してクラスタリング解析を行ったところ、Wls cKOマウスでは異常な顆粒膜細胞と閉鎖に向かう卵母細胞の集団の存在が推定された。組織学的な所見と一致して、Wls cKOマウスでは顆粒膜細胞の活性化が阻害されており、その二次的な作用で卵母細胞の成長が抑制されていることが示唆された。本解析をさらに進めることで卵胞の活性化と成長にともなう細胞集団の変遷を捉えられると期待される。顆粒膜細胞系譜について亜集団解析を行ったところ、コントロールとWls cKOマウス由来の共通の細胞集団として、未分化な前顆粒膜細胞が確認された。Wls cKOマウスでも正常な前顆粒膜細胞が存在するものの、活性化が起こってもコントロールとは異なる細胞分化の経路を示すことが明らかとなった。最も活性化が進んだ場合でも、一部の顆粒膜細胞マーカーの発現が低く留まり、最終的にはアポトーシスや炎症性応答の反応が進行することが推定された。