ヒト上皮性細胞無血清培養を用いる細胞増殖調節因子の検索と解析

利用人上皮细胞无血清培养物寻找和分析细胞生长调节剂

基本信息

批准号：
63010076
负责人：
宇多小路正
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Japanese Foundation For Cancer Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

项目摘要

1.上皮性細胞が腫瘍化した場合その多くは固形腫瘍を形成する。固形腫瘍の形成には細胞の自律性増殖のみでなく、増殖、分化を調節するシグナルを介した腫瘍細胞、間質細胞の相互作用が必要であると考えられる。これらの解析には既知、未知の増殖分化因子を含む血清を用いない培養細胞実験系が必要である。我々は培地の血清の排除に努力した。2.手術症例より得たヒト乳腺上皮細胞、乳癌細胞を用いて血清を会まない培地内でbasicFGFが癌由来細胞の増殖を有意に促進したが、同じ細胞の無血清コラゲンゲル内三次元培養ではbasicFGFは増殖を阻害することを見出した。3.食道癌からの扁平上皮性細胞の培養も血清の排除が進みつつある。皮膚微小片からの培養には未だ血清が必要であるが、直径1mm以下の皮膚片からも表皮細胞、線維芽細胞の培養が可能である。之等を用いて色素性乾皮症患者のDNA修復能の比較検討が行われた。表皮細胞が癌化すると、DNA損傷修復能は略。同じレベルであった線維芽細胞のそれよりも低下することが見出された。4.マウス由来の前脂肪細胞を用い、無血清培養液において細胞の分化系が開発された。これにより血清中の既知、未知の因子による干渉を受けない、脂肪細胞への分化の促進、阻害因子の検索が可能となった。5.ヒト甲状腺上皮細胞の培養は1〜2%牛胎仔血清、トランスフェリン、インシュリンを用いて培養可能、継代も可能であった。この系ではEGFには増殖促進効果は認められなかった。6.肺癌の培養では當初より血清を含まない培地を用いて2株の培養系を得た。培地の蛋白性成分はEGF、インシュリン、トランスフェリンのみである。

1。当上皮细胞变成肿瘤时，大多数会形成实体瘤。据认为，实体瘤的形成不仅需要自主细胞增殖，而且还需要通过调节增殖和分化的信号之间的肿瘤细胞和基质细胞之间的相互作用。这些分析需要一个无血清培养的细胞实验系统，其中包含已知和未知的生长分化因子。我们试图从培养基中消除血清。 2。基本FGF显着促进了癌症衍生细胞的增殖，在这种培养基中，血清与从外科手术病例中获得的人类乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞无关，但发现碱性FGF抑制了血清胶原蛋白凝胶中同一细胞的三维培养物中的基本FGF的增殖。 3。消除血清在食管癌的鳞状上皮细胞培养中也正在发展。从小皮肤碎片培养的仍然需要血清，但是表皮细胞和成纤维细胞也可以从直径为1 mm或更少的皮肤碎片中培养。使用这种方法，比较并检查了静脉皮肤色素患者的DNA修复能力并检查。当表皮细胞变成癌时，省略了其DNA损伤修复能力。发现它低于相同水平的成纤维细胞。 4。使用小鼠衍生的前脂肪细胞在无血清培养基中开发细胞分化系统。这使得不干扰血清中已知或未知因素，以促进脂肪细胞分化并寻找抑制剂。 5。人甲状腺上皮细胞可以使用1-2％的胎牛血清，转铁蛋白和胰岛素进行培养，并且也可以传递。在该系统中，在EGF中未观察到生长促进作用。 6。首先，使用无血清培养基培养了两种菌株，以获得两种菌株的培养系统。培养基的唯一蛋白质成分是EGF，胰岛素和转铁蛋白。