Elektronenmikroskopische Untersuchungen zur strukturellen Charakterisierung der bakteriellen Preprotein Translokase

细菌前蛋白转位酶结构表征的电子显微镜研究

基本信息

项目摘要

Der oligomere Enzymkomplex Preprotein Translokase aus Escherichia coli, bestehend aus dem löslichen bzw. membranassoziierten SecA und dem integralen, heterotrimeren XecYEG, assistiert den Transport von membranständigen und periplasmatischen Proteinen durch die Innermembran. Obwohl die Untereinheiten der Translokase genetisch und biochemisch weitgehend charakterisiert sind, sind die Vorstellungen über den Mechanismus der Translokation teilweise spekulativ und widersprüchlich; für ein besseres Verständnis sind Informationen über die Struktur und Konformationsänderungen der biologisch aktiven Translokase notwendig. Daher stellen die strukturelle Charakterisierung der Komponenten der Translokase, solubilisierter bzw. rekonstituierter Translokationsintermediate bzw. die Charakterisierung des Komplexes und seiner Konformationsänderungen mit den Mitteln der Elektronenmikroskopie/-kristallographie die Ziele des vorliegenden Vorhabens dar. Die Voraussetzungen dafür sind gegeben, da SecA und SceYEG rekombinant gewonnen werden können und in für Strukturanalyse geeigneten Mengen zur Verfügung stehen. Die im Rahmen des Vorhabens an in vitro Systemen gewonnenen Erkenntnisse sollen zu einer besseren Vorstellung über den Aufbau bzw. über die Funktionsweise der biologisch aktiven Translokase in vivo führen.
大肠杆菌中的寡聚体酶复合体前蛋白转座酶,是最有效的。 SecA 膜和完整的膜、异三聚体 XecYEG、膜内转运和周质蛋白的辅助运输。 Obwohl die Untereinheiten der Translokase Genetisch und Biochemisch Weitgehend Weitgehend Charakterisiert Sind, Sind die Vorstellungen über den Mechanismus der Translokation teilweise spekulativ und Widesprüchlich;其目的在于提供有关生物学活动的结构和信息的信息。 Daher stellen die strukturelle Charakterisierung der Komponenten der Translokase,solubilisierter bzw。 rekonstituierter Translokationsintermediate bzw.复杂的特性和复杂的结构与电子微控制器/-晶体学的细节有关。 Die Voraussetzungen dafür sind gegeben、da SecA 和 SceYEG rekombinant gewonnen werden können 和 für Strukturanalysis geeigneten Mengen zur Verfügung stehen。 Die im Rahmen des Vorhabens 是一个体外系统,它的作用是使 Vorstellung über den Aufbau bzw。体内转位酶的生物学活性的功能。

项目成果

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