二官能性リガンドを用いるタンパク-リダンド間相互作用の電気化学的評価とその挙動

使用双功能配体对蛋白质-红色和相互作用的电化学评估及其行为

• 批准号: 08740567
• 负责人: 菅原 一晴
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kitami Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08740567/
• 关键词: アビジン; ビオチン; ドウノマイシン; ナイルブルーA; ラベル化; N-ヨードアセチル-N-ビオチニルヘキシレンジアミン

電極活性物質でラベル化したビオチンを用いたアビジン-ビオチンアッセイ:本研究では、ビオチンをドウノマイシン、ナイルブルーAでラベル化しアビジンおよびビオチンの電気化学的な検出法の開発を行った。ラベル化した試薬は、アビジンのビオチンに対するサイトに結合すると電極活性物質部分までそのサイトに被覆される。そのため電極応答が変化するのでアビジンの検出が可能である。さらに、アビジンに対してビオチンとラベル化したビオチンを競争させることでビオチンの定量もできた。また、ビオチン部分と電極活性物質を異なる長さを持つスペーサーで結合させ、その効果についても検討した。スペーサーが長くなると疎水的性質が増加し電極への吸着性が増加する事が見いだされ、アビジンとの結合も強くなることがわかった。これはアビジン-ビオチン結合に加えてサイトとスペーサーの疎水的な相互作用が関与していることによるものと考えられる。アビジンとビオチンによる化学反応のコントロール:ビオチン誘導体であるN-ヨードアセチル-N-ビオチニルヘキシレンジアミン(IB)とシステインのチオール基とが結合するとヨウ化物イオンが遊離する反応を用いて電気化学的手法によるアビジン-ビオチンアッセイを検討した。IBがビオチン部分を持っているためこの反応はアビジンとビオチンによってコントロールされる。それゆえ、ヨウ化物イオンまたはシステインを測定することでアビジンとビオチンの検出ができる。高感度での検出を行うため、システインと相互作用する水銀(11)が用いた。水銀(0)から水銀(11)の酸化波を測定することでそれらを検出ができ、その感度は10^<-9>Mレベルであった。この方法はIB BoundとIB Freeを分離する必要がないと言う利点を持つ。

In this study, the development of electrochemistry method for electrode active material was carried out. The electrode active material is partially coated with the electrode active material. All the electrode changes are possible. In this case, the number of entries in the list is equal to the number of entries in the list. The electrode active material is different in length from the electrode active material. The increase in the absorption of hydrogen hydroxide by the electrode is due to the increase in the absorption of hydrogen hydroxide by the electrode. The interaction between the two groups is related to the interaction between the two groups. The chemical reaction of the compound is carried out by means of an electrochemical method. The IB has a partial list of all the items in the list. The test results show that there is no difference between the test results and the test results. High sensitivity, high sensitivity. Mercury (0), mercury (11) and acid wave determination<-9>. The method is IB Bound and IB Free.

项目成果

Kazuharu Sugawara: "Electrochemical detection of avidin and biotin by biotin labeled with cysteine" Fresenius Journal of Analytical Chemistry. (in press). (1997)

Kazuharu Sukawara：“通过半胱氨酸标记的生物素对亲和素和生物素进行电化学检测”费森尤斯分析化学杂志。

Kazuharu Sugawara: "Accumulation voltammetry of avidin and biotin using a biotin labeled with Nile Blue A" Bioelectrochemistry and Bioenergetics. 41. 167-172 (1996)

Kazuharu Sukawara：“使用尼罗蓝 A 标记的生物素进行抗生物素蛋白和生物素的累积伏安法”生物电化学和生物能学。

Kazuharu Sugawara: "The Spectrophotometric Determination of Trace Molybdenum (VI) after Collection and Elution as Molybdate ion on Protonated Chitin" Talanta. (in press). (1997)

Kazuharu Sukawara：“在质子化几丁质上收集和洗脱为钼酸根离子后，用分光光度法测定痕量钼 (VI)”Talanta。

Kazuharu Sugawara: "Electrochemical evalution of avidin-biotin interaction using N-iodoacetyl-N-Biotinylhexylenediamine" Bioelectrochemistry and Bioenergetics. 39. 309-312 (1996)

Kazuharu Sukawara：“使用 N-碘乙酰基-N-生物素己二胺对亲和素-生物素相互作用进行电化学评估”生物电化学和生物能学。

Kazuharu Sugawara: "Electrochemical behavior of cysteine at a Nafion/cobelt (II)" Journal of Electroanalytical Chemistry. 414. 253-256 (1996)

Kazuharu Sukawara：“半胱氨酸在 Nafion/钴带 (II) 上的电化学行为”《电分析化学杂志》。