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高等植物における細胞分裂の空間的制御の分子機構

高等植物细胞分裂空间控制的分子机制

基本信息

批准号：
08740617
负责人：
浅田哲弘
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

タバコ培養細胞で発現するキネシン様蛋白質TBK5とTBK10の全長をコードするcDNAをクローニングし、配列決定を行ない、さらに各蛋白質の性質、細胞内局在を解析した。TBK5とTBK10は、それぞれ633残基と703残基のアミノ酸からなり、共にキネシン様のモータードメインを中央領域をもつことが推定された。TBK10のモータードメインのアミノ酸配列はそれらのキネシン様蛋白質のモータードメインのアミノ酸配列に対して高い相同性を示す。一方、TBK5のモータードメインのアミノ酸配列は既知のキネシン様蛋白質のモータードメインのアミノ酸配列に対して高い相同性を示さず、いずれのサブファミリーにも属さないことが分かった。微小管に結合したTBK5は、ATP存在下でも微小管から解離しない性質をもつことが微小管共沈澱法を用いた実験により明らかになった。TBK5のモータードメインが他のキネシン様蛋白質のモータードメインにはない特異な性質をもつ可能性やモータードメイン以外のドメインがATP感受性をもたない微小管結合部位を含む可能性が考えられる。ポリクローナル抗体を用いた間接蛍光抗体法観察によって、BY-2細胞におけるTBK5とTBK10の局在を調べた結果、TBK5は、間期の細胞表層微小管、前期前微小管束、分裂期の紡錘体微小管、隔膜形成体微小管と細胞内局在を共にすることが明らかになった。一方、TBK10は微小管とは共存せず、円盤状の細胞小器官に局在することが分った。植物細胞における細胞小器官の輸送、局在化には、ミオシンが働くことが古くから知られているがTBK10が細胞小器官に局在することは、微小管モーターも細胞小器官の輸送や局在化に関わる可能性を示している。本年度の解析結果は、TBK5とTBK10がともに植物微小管の機能発現(細胞形態形成、分裂面制御等)に関わる新規モーター分子であることを示している。

The full-length cDNA sequences of TBK5 and TBK10 were determined by sequencing, and the properties and intracellular functions of each protein were analyzed. TBK5 and TBK10 are opposite, and residues 633 and 703 are opposite. TBK10's amino acid sequence of the target protein is shown to be highly identical to that of the target protein. In one aspect, TBK5's amino acid sequence is different from that of the known amino acid sequence of protein. Microtube binding TBK5 in the presence of ATP can be used in microtube coprecipitation. TBK5's molecular structure and protein's molecular structure and protein's specific properties are examined in terms of the possibility of ATP sensitivity and the possibility of microtube-binding sites. The results showed that TBK5 and TBK10 were regulated in BY-2 cells by indirect light antibody method, TBK5 and TBK10 were regulated in interphase cells, microtubules in prophase, spindle microtubules in mitotic stage, and microtubules in septum-forming bodies. A square, TBK10 microtube blue shift, disk shaped small cell organ, Plant cell organelle transport, organelle transport This year's analysis results show that TBK5 and TBK10 are related to the functional development of plant microtubules (cell morphology formation, division surface control, etc.).