植物細胞の細胞質分裂に関与するキネシン様蛋白質群の解析

植物细胞胞质分裂中涉及的驱动蛋白样蛋白的分析

• 批准号: 08253207
• 负责人: 浅田 哲弘
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08253207/
• 关键词: 微小管; キネシン様タンパク質; タバコ培養細胞; 細胞分裂; 細胞形態形成

タバコ培養細胞で発現するキネシン様蛋白質TBK5とTBK10の全長をコードするcDNAをクローニングし、配列決定を行ない、さらに各蛋白質の性質、細胞内局在を解析した。TBK5とTBK10は、それぞれ63残基と703残基のアミノ酸からなり、共にキネシン様のモータードメインを中央領域にもつことが推定された。TBK10のモータードメインのアミノ酸配列はそれらのキネシン様蛋白質のモータードメインのアミノ酸配列に対して高い相同性を示す。一方、TBK5のモータードメインのアミノ酸配列は既知のキネシン様蛋白質のモータードメインのアミノ酸配列に対して高い相同性を示さず、いずれのサブファミリーにも属さないことが分った。微小管に結合したTBK5は、ATP存在下でも微小管から解離しない性質をもつことが微小管共沈殿法を用いた実験により明らかになった。TBK5のモータードメインが他のキネシン様蛋白質のモータードメインにはない特異な性質をもつ可能性やモータードメイン以外のドメインがATP感受性をもたない微小管結合部位を含む可能性が考えられる。ポリクローナル抗体を用いた間接蛍光抗体法観察によって、BY-2細胞におけるTBK5とTBK10の局在を調べた結果、TBK5は、間期の細胞表層微小管、前期前微小管束、分裂期の紡錘体微小管、隔膜形成体微小管と細胞内局在を共にすることが明らかになった。一方、TBK10は微小管とは共存せず、円盤状の細胞小器官に局在することが分った。植物細胞における細胞小器官の輸送、局在化には、ミオシンが働くことが古くから知られているが、TBK10が細胞小器官に局在することは、微小管モーターも細胞小器官の輸送や局在化に関わる可能性を示している。本年度の解析結果は、TBK5とTBK10がともに植物微小管の機能発現(細胞形態形成、分裂面制御等)に関わる新規モーター分子であることを示している。

タ バ コ culture cell で 発 now す る キ ネ シ ン others in protein TBK5 と TBK10 の span を コ ー ド す る cDNA を ク ロ ー ニ ン グ し, distribution line column decided を な い, さ ら に various protein の properties, intracellular bureau in を parsing し た. TBK5 と TBK10 は, そ れ ぞ れ 63 residues と 703 residues の ア ミ ノ acid か ら な り, に キ ネ シ ン others の モ ー タ ー ド メ イ ン を central areas に も つ こ と が presumption さ れ た. TBK10 の モ ー タ ー ド メ イ ン の ア ミ ノ acid with column は そ れ ら の キ ネ シ ン others in protein の モ ー タ ー ド メ イ ン の ア ミ ノ acid with column に し seaborne て high い identity を す. One party, TBK5 の モ ー タ ー ド メ イ ン の ア ミ ノ acid with column は already know の キ ネ シ ン others in protein の モ ー タ ー ド メ イ ン の ア ミ ノ acid with column に し seaborne て high い identity を shown さ ず, い ず れ の サ ブ フ ァ ミ リ ー に も genus さ な い こ と が points っ た. Small tube に combining し た TBK5 は, the presence of ATP で も tiny tube か ら dissociation し な い nature を も つ こ と が tiny tube を Shen Dian method with total い た be 験 に よ り Ming ら か に な っ た. TBK5 の モ ー タ ー ド メ イ ン が he の キ ネ シ ン others in protein の モ ー タ ー ド メ イ ン に は な い specific な nature を も つ possibility や モ ー タ ー ド メ イ ン outside の ド メ イ ン が ATP sensitivity を も た な い tiny pipe combining site を including む possibility が examination え ら れ る. を ポ リ ク ロ ー ナ ル antibody with い た 蛍 indirect light antibody technique 観 examine に よ っ て, BY - 2 cells に お け る TBK5 と TBK10 の bureau in を adjustable べ た results, TBK5 は, interphase の cells surface tiny tubes, the former small bundles, divide の spindle cell formed BY the tiny tubes, the diaphragm body tiny tube と inside bureau in を に す る こ と が Ming ら か に な Youdaoplaceholder0. One side, TBK10 <s:1> microtubules と せず coexist せず, and disc-shaped <s:1> cell small organs に are localized at する <s:1> とが った った った った. Plant cell に お け る cells small organ の transmission, bureau in turn に は, ミ オ シ ン が 働 く こ と が ancient く か ら know ら れ て い る が, TBK10 が cells small organ に bureau in す る こ と は, tiny tubes モ ー タ ー も cells small organ の conveying や bureau in turn に masato わ を る possibility in し て い る. Analytical results this year の は, TBK5 と TBK10 が と も に plant function of tiny tube の 発 now (cell shape forming and suppression of the split) に masato わ る new rules モ ー タ ー molecular で あ る こ と を shown し て い る.

项目成果

T.Asada,R.Kuriyama,and H.Shibaoka: "TKRP125,a kinesin-related protein involved in the centrosome-independednt organization of the cytokinetic apparatus of tobacco BY-2 cells." Journal of Cell Science. 110. 179-189 (1997)

T.Asada、R.Kuriyama 和 H.Shibaoka：“TKRP125，一种驱动蛋白相关蛋白，参与烟草 BY-2 细胞细胞因子装置的中心体独立组织。”

T.Asada and D.Collings: "Molecular motor in higher plants." Trends in Plant Science. 2・1. 29-36 (1997)

T.Asada 和 D.Collings：“高等植物中的分子马达。”植物科学趋势 2・1（1997 年）。