植物細胞の細胞質分裂に関与する微小管モーター蛋白質の解析

参与植物细胞胞质分裂的微管运动蛋白分析

• 批准号: 07261206
• 负责人: 浅田 哲弘
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07261206/
• 关键词: 植物; タバコ培養細胞; 隔膜形成体; 微小管; モータータンパク質

タバコ培養細胞BY-2の隔膜形成体から単離した微小管系モータータンパク質TKRP125の分子構造と生理機能に関する以下の新しい知見(A-C)を得た。A)TKRP125の全長1060アミノ酸残基をコードするcDNAをクローニングし、配列決定を行なった結果、TKRP125は、N末端側にキネシン様モータードメインを持ち、C末端側に独自のアミノ酸配列を持つキネシンスーパーファミリーの新しいメンバーであることが判明した。B)TKRP125モータードメインのATP/GTP結合部位と微小管結合部位の間に存在する15残基のアミノ酸配列を認識する抗ペプチド抗体(pAb125)を細胞膜を透過性にしたタバコ培養細胞BY-2に導入すると、隔膜形成体微小管の滑べり運動が抑制されることから、TKRP125が、隔膜形成体における微小管のマイナス端方向への動きを担うモーターであることが明らかになった。C)冷却CCDカメラを用いてチューブリン-TKRP125の2重染色像をコンピューターに入力し、画像補正、画像解析を行なうことにより、細胞内の微小管に沿って分布するTKRP125には濃度的な勾配があることが明らかになった。本研究は、TKRP125が、分子構造と生理機能の両面において、これまで調べられてきたキネシン様蛋白質と異なる特有の性質をもつことを示した。「細胞内のTKRP125は、微小管を極性移動させ、また微小管上を極性移動する」。今後、TKRP125と細胞内微細構造の関係を明らかにすることにより、微小管編成の動的機構に関する一般モデルの構築をめざす。

The following new insights (A-C) on the molecular structure and physiological function of TKRP125 were obtained from the membrane formation of BY-2 cells in culture. A) The cDNA sequence of TKRP125 with a total length of 1060 amino acid residues was determined by sequence analysis. The results showed that TKRP125 had a sequence analysis on the N-terminal side and an independent sequence analysis on the C-terminal side. B)TKRP125 residues and their acid sequences are recognized between ATP/GTP binding site and microtubule binding site of the receptor. Anti-tumor antibody (pAb125) is introduced into cultured cells BY-2 to inhibit membrane formation and microtubule sliding motion. Diaphragm forming body: microtube C) Cooling CCD camera application-TKRP 125's two-fold stained image, image correction, image analysis, distribution of microtubes in cells along the axis, and concentration of TKRP125. This study demonstrates the unique properties of TKRP125, its molecular structure and physiological function. "TKRP125 in the cell, micro-tube polarity shift, micro-tube polarity shift." From now on, the relationship between TKRP125 and intracellular microstructure will be clarified.

项目成果

Shibaoka, H., Asada, T., Yamamoto, S. and Sonobe. S: "The use of model system propaned from tobacco BY-2 cells for studies of the plant cytoskeleton" J, Microscopy. 181. (1996)

Shibaoka, H.、Asada, T.、Yamamoto, S. 和 Sonobe。