生理活性ペプチドの大量生産に応用可能なウシ乳腺細胞株の開発

适用于生物活性肽大规模生产的牛乳腺细胞系的开发

• 批准号: 08876050
• 负责人: 佐々木 康之
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08876050/
• 关键词: 乳腺; ウシ; タンパク質合成

ウシ乳腺細胞は大量のペプチドおよびタンパク質を合成し、分泌し続ける数少ない細胞であり、工業レベルでのペプチド生産への応用が期待される。そこで、この様なペプチド生産を目的とした乳腺細胞の開発のために、以下の実験を行った。まず、増殖能の高い細胞株を得るために、乳腺細胞の増殖が盛んな妊娠期のウシから乳腺組織を取り出し、常法にしたがって乳腺上皮細胞を単離した。すなわち、取り出した乳腺組織を緩衝液で洗浄した後細切し、コラ-ゲナーゼで処理、ナイロンメッシュでの濾過を行って未消化の組織を除いた。得られた細胞をクローニングし、抗ケラチン抗体陽性細胞、すななわち上皮細胞と思われるクローンを単離した。現在、2度のスクリーニングにより6つのクローンが得られている。これらのクローンについて、増殖能の検討を行い、3つのクローンについては15代まで継代可能であることが明らかになっている。さらに分化能については、プロラクチン、コルチゾール、インスリン等を用いて、カゼインの発現を指標として検討を行っている。カゼインの検出は、カゼイン抗体を用いて、蛍光抗体法およびウエスタンブロッティング法により検討中である。今後は、増殖能を持った細胞を単離し、分化をコントロールできるような実験系を作成し、さらにタンパク質合成能について検討していく予定である。

There are a large number of breast cancer cells, a large number of breast cancer cells. The purpose of this study is to open the breast cancer cell for the first time, and to do the following. The breast tissue was removed from the breast tissue during pregnancy, and the breast epithelial cells were isolated by normal method. The tissue fluid of the breast tissue was removed, and the tissue fluid of the breast tissue was removed. After washing, the breast tissue was removed. We have to know that we have sex cells, anti-virus antibodies, epithelial cells, and isolated cells. Now, it's 2 degrees. I don't know. Now, at 2 degrees, I don't know. In the first place, you may be able to grow in the first half of the year, and you may be able to do so. The differentiation can make a difference in the use of information, and so on. The antibody was detected by the method of light antibody, and the antibody was detected. In the future, the plant will be able to separate the cells, differentiate the cells, make the system, and synthesize the system.