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動物実験系及び培養細胞系を用いた牛乳ムチンの生理機能評価

利用动物实验系统和培养细胞系统评价乳粘蛋白的生理功能

基本信息

批准号：
09460121
负责人：
金丸義敬
金额：
$ 8.9万
依托单位：
Gifu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至 1998
项目状态：
已结题

项目摘要

ミルクムチンは乳に含まれるムチン型糖鎖を結合した巨大なタンパク質複合体を指すが、我々は牛乳ムチンの生理機能を実験動物と培養細胞を用いて評価することを目的として本研究を行い、次のような結果を得た。(1)牛乳ムチンの調製とそのタンパク質化学的性質-Sepharose CL-6Bゲルろ過でのvoid容画分(F1)として、膜を通して分画・濃縮した乳清タンパク質濃縮物から牛乳ムチン調製を可能とした。F1には150〜180kDaのPAS-I、120kDaの120K、80kDaの80K、それに数千kDa以上と推定されるHMGPが主要成分として存在し、他に約50kDa以下の分子量を持つ複数の微量成分も含まれている事がSDS-PAGEから明らかにされた。これらはいずれも天然状態では巨大な会合体を形成して、F1として牛乳から分画回収されるが、SDS含有緩衝液系でのゲルろ過によって各成分を個別回収可能であることが示された。(2)抗ウイルス作用-F1の強力なヒトロタウィルス感染阻害作用には複数の成分が関与しており、特に分子量が5万以下の微量タンパク質成分が極めて強力な阻害活性を示すことが明らかとなった。マウスを用いた動物実験でF1に下痢症予防効果はほとんど認められなかった。(3)抗がん作用-マウスの二重移植腫瘍系において、F1を直接投与した原発腫瘍部位は全てのマウスでほぼ完全に消失した。また、遠隔腫瘍部位にも顕著な退縮が認められ、一部のマウスでほぼ完全な消失が見られた。現在F1中の作用物質を特定するとともに、経口投与による影響の評価を計画している(4)コレステロール低下作用-牛乳ムチン(F1)共存下であらかじめミセル形成を行ってから培地に加えると、カゼインペプチドやオボムチン、あるいは大豆ペプチドの場合に比べ、腸由来培養細胞であるCaco-2細胞によるコレステロール吸収に極めて強力な抑制が認められた。現在F1給餌による血中コレステロール値の低下作用について検討中である。(5)成長調節作用-IEC6細胞の増殖に及ぼす牛乳ムチン(F1)の影響を評価したところ、一部のF1分画物に明らかな増殖促進作用が認められた。現在F1給餌による成長促進作用について動物実験を計画中である。

The purpose of this study is to evaluate the physiological function of milk containing a large number of sugar chains. (1)Sepharose CL-6B is a kind of membrane that can be used for the preparation of milk concentrate. F1 contains PAS-I of 150~180 kDa, PAS-I of 120 kDa~120 K, PAS-I of 80 kDa~80 K, PAS-I of 120 kDa~120 K, PAS-I of 80 kDa~80 K, PAS-I of 120 kDa~120 kDa, PAS-I of 120 kDa~120 K, PAS-I of 120 kDa~120 kDa~120 K, PAS-I of 120 kDa~120 kDa~120 K, PAS-I of 120 kDa~120 kDa~120 K, PAS-I of 120 kDa~120 kDa, PAS-I of 120 kDa~120 kDa In the natural state, there is a possibility of individual recovery of each component, such as F1 and SDS. (2)Anti-virus activity-F1 has strong anti-virus activity, and its molecular weight is less than 50,000. The animal is used to prevent diarrhea. The animal is used to prevent diarrhea. (3)Anti-tumor effect- A part of the tumor is completely disappeared. Now F1 active substances are specified in the following ways: (4) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (5) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (6) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (7) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (8) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (9) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (10) Low activity of the active substances in milk (F1) Blue shift: (10) Low activity of the active substances in milk (F1) Caco-2 cells are strongly inhibited by cell culture. Now F1 feed is in the middle of the blood, the value of the low effect is in the middle of the discussion. (5)Growth regulation-The effects of growth and apoptosis on the proliferation of IEC 6 cells were evaluated. Some F1 molecules were found to promote proliferation. Now F1 is feeding on growth promotion.