卵巣癌化の分子機構に関する研究、癌抑制遺伝子のクローニング

卵巢癌发生分子机制研究、抑癌基因克隆

• 批准号: 09671664
• 负责人: 鹿沼 達哉
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09671664/
• 关键词: 卵巣癌; TGF β; Smad; 子宮内幕癌; hMTH1; p16^<INK4A>; Differential Display法; TGF-β; 子宮内膜癌; TGF-β typeIIレセプター; smad3; Smad4(DPC4); P16; 癌抑制遺伝子

1)p16-cyclinD/cdk4-Rb系の遺伝子変異と卵巣癌化の分子機構との関わりを、ヒ卜卵巣癌細胞株を用いて行った。癌抑制遺伝子と考えられているp16あるいはRbの高頻度の機能喪失が卵巣癌株において観察されて癌遺伝子と考えられているcyclinDの過剰発現が観察された。卵巣癌の約90%においてp16・cyclinD/cdk4・Rb系の一つの遺伝子に機能異常が存在することが示された。2)ヒト卵巣癌組織のSmad3遺伝子の変異を解析した。Exon2で7例(29%)にLOHが観察され、2例にバンドシフトが観察された。Exon5では1例にバンドシフトが観祭された。ヒト卵巣癌の41,7%(10/24例)でSmad3に異常が存在することが示唆された。3)ヒト卵巣癌組織を用いて、TGF・β R I, TGF・β R II, Smad2, Smad4の変異の有無を解析した。TGF・β R I 遺伝子Exon5内で10例(31.3%)にframeshift mutationが観察された。Frameshift mutationが観察された症例ではTGF・β R I蛋白の発現がみられなかった。4)hMTH1遺伝子について卵巣癌組織49例、ヒト卵巣癌組織株9例を用いて解析した。卵巣癌組織49例中1例と卵巣癌培養細胞株9例中1例(3.4%)で、NsiI多型が認められた。癌組織12例、細胞株2例(24.1%)において、codon119にサイレント変異が認められた。5)子宮内膜癌組織でのER-βの発現様式と、癌の準展や悪性度との関連について検討した。子宮内膜癌組織36例の臨床進行期、細胞分化度、筋層浸潤の深さとER・β/ER・αの発現比を比較した。多変量解析の結果、ER・β/ER・α ratioと筋層浸潤の深さとの間には有意な相間があり、筋層浸潤の程度が深いものほどER・βがER・αに比べ相対的に強く発現していた。6)エストロゲンによって子宮内膜癌に誘導される遺伝子を同定し、癌化との関わりを解析することを目的としてDifferential Displayを行った。遺伝子fragment(Probe1)と遺伝子fragment(Probe2)を単離した。Probe1はDouble strand DNA break-repair geneと、Probe2はmouse E46 LIKE geneと、それぞれ99%、98%のホモロジーを有していた。DSBR遺伝子は、遺伝子修復機構の他に,Eによる細胞増殖に関与する遺伝子であり、マウスの脳に発現していること以外その機学が未知であつたE46遺伝子には、Eによる細胞増殖を抑制する働きがある可能性が示唆された。

1)p16-cyclinD/cdk4-Rb gene mutation is related to molecular mechanism of ovarian cancer and its application in ovarian cancer cell lines. Cancer suppressor gene test p16, Rb, high frequency of loss of function, cancer cell line test p16, Rb, Rb About 90% of ovarian carcinomas contain p16 cyclin D/cdk4 Rb family members and some of them have functional abnormalities. 2) Analysis of Smad3 gene differences in ovarian cancer tissues. Exon2:7 (29%) LOH was detected, 2:2 LOH was detected. Exon5 is the first time that a person has been killed. 41.7%(10/24 cases) of ovarian cancer showed abnormal Smad3. 3) The presence or absence of TGF β R I, TGF β R II, Smad2 and Smad4 in ovarian cancer tissues was analyzed. TGF β I gene Exon5 in 10 cases (31.3%) frameshift mutation was detected. Frameshift mutation is detected in the presence of TGF β R I protein. 4) hMTH1 gene was detected in 49 cases of ovarian carcinoma and 9 cases of ovarian carcinoma. 1 case (3.4%) of oocyte carcinoma tissue and 1 case (3.4%) of oocyte carcinoma culture cell line were identified. Cancer tissue 12 cases, cell line 2 cases (24.1%), codon119 cases, different recognition. 5)The development of ER-β in endometrial cancer tissues, the development of cancer, and the relationship between ER-β and endometrial cancer are discussed. Clinical progression, cell differentiation, depth of tendon invasion, and ER·β/ER·α ratio were compared in 36 cases of endometrial carcinoma. The results of multi-dimensional analysis show that ER·β/ER·α ratio is stronger than ER·β ratio and ER·α ratio is stronger than ER·β ratio. 6) Endometrial cancer induction, Differential Display Fragment(Probe1) and Fragment(Probe2) Probe1 Double strand DNA break-repair gene, Probe2 mouse E46 LIKE gene, DSBR gene transfer, gene repair mechanism and other aspects,E, cell proliferation related to gene transfer, gene discovery, other mechanisms unknown, E, cell proliferation inhibition possibility is shown.

项目成果

Fumiko Takama, Tatsuya Kanuma et al.: "Estrogen Receptor β expression and depth of myometrial invasion in human ondometrial cancer"Clinical Cancer Research. (Under contribution).

Fumiko Takama、Tatsuya Kanuma 等人：“人类子宫内膜癌中雌激素受体 β 表达和肌层浸润深度”临床癌症研究（正在投稿）。

Wang Dang, Tatsuya Kanuma et al.: "Analysis of nene alteration in TGF-β signal transdution pathway in human ovarian cancer"Cancer Research. (Under contribution).

王当、鹿沼达也等：“人卵巢癌中TGF-β信号转导途径的nene改变分析”癌症研究（投稿中）。

Tatsuya Kanuma: "Role of the Rb-mediated cell cycle regulatory pathway in humanovarian cancer cell lines" Annales of Cancer research and Therapy. 6(1). 51-57 (1997)

Tatsuya Kanuma：“Rb 介导的细胞周期调节途径在人卵巢癌细胞系中的作用”《癌症研究与治疗年鉴》。

Fumiko Takama, Tatsuya Kanuma et al.: "Alterations of the hMTH1 gene may not be specifically associated with sporadic human ovarian cancer"International Journal of Oncology. (Under contribution).

Fumiko Takama、Tatsuya Kanuma 等人：“hMTH1 基因的改变可能与散发性人类卵巢癌没有特异性关联”国际肿瘤学杂志。

Tatsuya Kanuma: "Role of the Rb-mediated cell cycle regulatory pathuay in human ovarian cancer cell lines" Annals of Caucer Researoh and Therapy. 6(1). 51-57 (1997)

Tatsuya Kanuma：“Rb 介导的细胞周期调节途径在人类卵巢癌细胞系中的作用”Caucer Researoh 和 Therapy 年鉴。