体液の電解質レベルの上昇によって誘導される新規蛋白質のクローニング

体液电解质水平升高诱导新型蛋白质的克隆

• 批准号: 09877034
• 负责人: 岡本 光弘
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877034/
• 关键词: 高塩食; ナトリウム食; カリウム食; 副腎; 腎臓; プロテインキナーゼ

哺乳動物の体液に含まれる電解質の濃度はきわめて厳密に制御されている。電解質の中でもとくにナトリウムとカリウムは重要で,血漿中のこれらのイオン濃度が急激に極端に変動すると循環機能や神経機能の重篤な異常を招くし,慢性的な高ナトリウム,低カリウム血症は高血圧症を引き起こす。これらの病態がどのような分子機構で起こるのかについては未解明の部分が多くある。われわれはラットにカリウムあるいはナトリウムを負荷した時と正常飼料で飼育した時とで発現量が明確に異なるmRNAのcDNA断片を偶然に単離した。この断片の塩基配列(220bp)を決定し既知遺伝子の塩基配列とのホモロジー検索を行ったところ,この断片は新規の遺伝子に由来するものであることが分かった。新規遺伝子のmRNAは正常食飼育の副腎にはほとんど存在しないが,高塩食,とくに高カリウム食飼育で高いレベルの発現が認められたそこでこの遺伝子の全長cDNAをクローニングした。この遺伝子はSNFl/AMPKファミリーに属する新規のセリン/トレオニン・プロテインキナーゼをコードする,そして副腎皮質に由来する細胞株であるY1細胞をACTHで刺激すると30分以内にメッセージが著明に増大する,またラットにACTHを腹腔内投与すると副腎のmRNAレベルが著明に上昇するととなどが分かった。これらの結果は新規プロテインキナーゼが副腎皮質機能の発現シグナルあるいは副腎皮質細胞の増殖シグナルに深く関わることを示唆している。これまでの結果をまとめて第71回日本生化学会大会において発表し,さらに論文にまとめて学術雑誌に投稿中である。

Mammalian body fluids contain electrolyte concentrations that vary from one to the next. Electrolyte concentration is important, plasma concentration is extremely volatile, circulation function and nervous system function are abnormal, chronic hypertension, hypothermia and hypertension occur. The molecular mechanism of the disease is not clear. The amount of mRNA and cDNA fragments found in the diet was significantly different from that found in the normal diet. The fragment's base alignment (220bp) determines the base alignment of the known gene and the origin of the fragment's new gene. The mRNA expression of the new gene was detected in the accessory kidney of the normal diet, and the full-length cDNA of the new gene was detected in the accessory kidney of the normal diet. The expression of ACTH mRNA in Y1 cells stimulated by ACTH increased within 30 minutes after intraperitoneal injection of ACTH into the adrenal cortex. The results showed that the development of adrenal cortical function was closely related to the proliferation of adrenal cortical cells. The 71st meeting of the Japan Biochemical Society was held in Beijing.

项目成果

S.K. Halder et al.: "Cloning of a membrance-spanning protein with epidermal growth factor-like repeat motifs from adrenal glomerulosa." Endocrinology. 139. 3316-3328 (1998)

S.K.

Z.Wang, et al.: "Molecular clonig and characterigation of a novel salt-indecible gene tosom rat adrenal." 生化学. 70. 873 (1998)

Z.Wang 等人：“新型盐不可分辨的大鼠肾上腺基因的分子克隆和表征”，生物化学 70. 873 (1998)。

Takemori.H., et al: "Identification of functional domains of rat intestinal phospholipase B/lipase. Its cDNA cloning,expression,and tissue distribution." J.Biol.Chem.273. 2222-2231 (1998)

Takemori.H. 等人：“大鼠肠磷脂酶 B/脂肪酶功能域的鉴定。其 cDNA 克隆、表达和组织分布。”

M.Okamoto et al.: "Implication of ZOG protein in zone development of the adrenal cortex." Endocrine Res.24. 515-520 (1998)

M.Okamoto 等人：“ZOG 蛋白在肾上腺皮质区域发育中的意义。”

Y. Nonaka et al.: "Structure/function relationship of CYP11B1 associated with Dahl's salt-resitant rats Expresslon in E.coll." Eur. J. Biochem.258. 869-878 (1998)

Y. Nonaka 等人：“CYP11B1 与大肠杆菌中 Dahl 耐盐大鼠 Expresslon 相关的结构/功能关系。”