ヒトTNF遺伝子を導入したヒト線維芽細胞の抗腫瘍効果

导入人TNF基因的人成纤维细胞的抗肿瘤作用

• 批准号: 09877045
• 负责人: 難波 正義
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877045/
• 关键词: TNF; 癌治療; TNF産生ヒト細胞; カプセル化; TNF-α; Human cells; Transfection; Cancer treatment; Radicals; Antioxydant; In Vitro

コバルト60ガンマー線照射で不死化した脱瘍性をもたないヒト線維芽細胞にTNF-αを導入し,TNF-αを産生する細胞のクローンを取得した.この細胞を培養した培地(Conditioned medium:CM)を,ヒト由来の肺癌(A549),卵巣癌(PA-1),肝癌(HLE,HLF,JHH-7),試験管内で癌化したヒト線維芽細胞(KMST-6/RAS)の培養培地に終濃度10%添加すると,これらの細胞の増殖を45-92%抑制した.この細胞増殖抑制作用はCMの濃度依存性であった.また,この細胞増殖抑制作用は細胞の産生ずるTNF-αであることを,抗TNF-α抗体で証明した.一方,ヒト由来の正常線維芽細胞(KMS-6),子宮癌(HeLa),肝癌(PLC/PLF/5,JI-II-I-l,HuH-6,HepG2)などの細胞の増殖は抑制しなかった.したがって,TNF-α産生細胞は約50%のヒト腫瘍の増殖を抑えることが分かった.このTNF-α産生細胞を,臨床的に応用できるかどうかを検討するために,この細胞をスフエロイド培養し,そのスフエロイドをアガロース,カルボキシメチール-レルローズでカプセル化した.このカプセル化TNF細胞は培地に1カ月間にわたってTNFを産生した.

コ バ ル ト 60 ガ ン マ で die change し ー irradiation た sores off sex を も た な い ヒ ト line d bud cells に TNF alpha を import し, TNF alpha を produce す る cells の ク ロ ー ン を obtain し た. こ の cell を culture し た petty (Conditioned Medium: CM) を, ヒ ト origin の lung cancer (A549), egg 巣 carcinoma (PA), liver (HLE, HLF, JHH - 7), the test tube で canceration し た ヒ ト line d bud cells (KMST - 6 / RAS) の cultivate the petty に final concentration of 10% added す る と, こ れ ら の cells の raised colonization を 45-92% inhibition し た Rights. こ の cell colonization inhibition は CM の concentration dependence で あ っ た. ま た, こ の cells inhibition は rights colonization の produce ず る TNF alpha で あ る こ と を, anti TNF alpha antibody で prove し た. Side, ヒ ト origin の normal line d bud cells (KMS - 6), cervical cancer (HeLa), liver cancer (PLC/PLF / 5, JI - II - I - l, HuH - 6, HepG2) な ど の は inhibit cell の raised colonization し な か っ た. し た が っ て, TNF alpha cells は about 50% の ヒ ト swollen sores の raised colonization を え suppression る こ と が Points か っ た. こ の TNF alpha cells を, clinical に 応 with で き る か ど う か を beg す 検 る た め に, こ の cells を ス フ エ ロ イ ド cultivate し, そ の ス フ エ ロ イ ド を ア ガ ロ ー ス, カ ル ボ キ シ メ チ ー ル - レ ル ロ ー ズ で カ プ セ ル change し た. こ の カ プ セ ル the TNF cells は petty に カ 1 months に わ た っ て T NFを produces た.

项目成果

Miyazaki,M.: "Transforming growth factor-β1 stimulates or inhibits cell growth via down-or up-regulation of p21/Waf1." Biochem.Biophys.Res.Commun.246. 873-880 (1998)

Miyazaki, M.：“转化生长因子-β1 通过下调或上调 p21/Waf1 刺激或抑制细胞生长。”Biochem.Biophys.Res.Commun.246 (1998)。

Namba,M., et al.: "The telomere lengthening mechanism in telomerase-negative immortal human cells does not involve the telomerase RNA subunit." Hum.Mol.Genet.6. 921-926 (1997)

Namba,M. 等人：“端粒酶阴性永生人类细胞中的端粒延长机制不涉及端粒酶 RNA 亚基。”

Tagashira,H.: "Reduced metastatic potential and c-myc overexpression of colon adenocarcinoma cells (Colon 26 line) transfected with nm23-R2/rat nucleoside diphosphate kinase α isoform." Int.J.Mol.Med,. 2. 25-68 (1998)

Tagashira,H.：“用 nm23-R2/大鼠核苷二磷酸激酶 α 同工型转染的结肠腺癌细胞（结肠 26 系）的转移潜力降低，c-myc 过度表达。” 68 (1998)

Namba,M., et al.: "Screening the p53 status of human cell lines using a yeast functional assay." Mol.Carcinog.19. 243-253 (1997)

Namba,M., et al.：“使用酵母功能测定筛选人类细胞系的 p53 状态。”

Kondo,T.: "Characteristics of intracellular transferrin produced by human fibroblasts : Its posttranscriptional regulation and association with tubulin." Exp.Cell Res.242. 38-44 (1998)

Kondo,T.：“人成纤维细胞产生的细胞内转铁蛋白的特征：其转录后调节以及与微管蛋白的关联。”