权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

繊毛が成体脳の神経新生と神経細胞の機能に果たす役割の解析

纤毛在成人脑神经发生和神经元功能中的作用分析

基本信息

批准号：
13J02368
负责人：
茶屋太郎
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Osaka University (2014)Kyoto University (2013)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2013
资助国家：
日本
起止时间：
2013-04-01 至 2015-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13J02368/
关键词：
繊毛蛋白質輸送神経キナーゼ

项目摘要

本年度は新規に繊毛へ局在するキナーゼを同定するために、培養細胞を用いたキナーゼの細胞内局在スクリーニングを行った。これはFlagタグを付加した目的の蛋白質をNIH3T3細胞に発現させ、Flagと繊毛のマーカーであるアセチル化チューブリンに対する抗体を用いた免疫染色により繊毛への局在の有無を判定するものである。現在までに2つの繊毛において機能未知のキナーゼが繊毛に局在することを見出した。これらはいずれもICKとキナーゼドメインにおける相同性が高く、ICKと同様の機能を持つ可能性があり興味が持たれる。今後は、培養細胞を用いた実験により繊毛形成や繊毛内輸送に対する機能を調べ、さらにノックアウトマウスの作製を行いその表現型を解析し、生体内における機能を明らかにしたい。また昨年度まで私たちが行ってきたICKの機能解析をさらに発展させる形で内耳有毛細胞におけるICKの機能を解析することにより、繊毛の形成・機能異常に起因する聴覚障害が引き起こされる分子メカニズムを明らかにすることを目的として研究を行った。私たちはICK欠損マウスにおいて、蝸牛の長さが短縮していることを見出した。有毛細胞を走査型電子顕微鏡を用いて観察すると、ICK欠損マウスにおいて、V字型に配列した不動毛の頂点に動毛が存在しないものや、不動毛の配置の規則性が乱れているものが増加していた。次にICKの欠損による聴力への影響を調べた。ICK欠損マウスは新生児致死となり成体マウスでの解析ができないため、ICK floxマウスと内耳においてCreを発現するトランスジェニックマウスを掛け合わせて、コンディショナルノックアウト（CKO）マウスを得た。このICKを内耳において欠損させたマウスを用いて、聴性脳幹反応（ABR）や歪成分耳音響放射（DPOAE）を測定すると、ICK CKOマウスでは聴力の低下が認められた。

This year's new rules and regulations are set in the same time as the new regulations and training. The cells are nourished by the nutrients inside the cells.これはFlagタグをFUKAしたpurposeのproteinをNIH3T3 cellsに発appearさせ、Flagと繊毛のマーカーであThe presence or absence of るアセチル化チューブリンに対する antibody was determined by immunostaining with いた. Now the までに2つの繊毛においてfunction is unknownのキナーゼが繊毛にbureau in することを见出した.これらはいずれもICKとキナーゼドメインにおける Sameness高く、ICKと同様のFUNCTION を KEEP つ POSSIBILITY があり INTEREST KEEP たれる. In the future, the cultured cells will be used to form and transport cells within the hairs, and the functions of the cells will be adjusted and adjusted.ックアウトマウスの出行いそのphenotypeをANALYSISし, in vivo functional を明らかにしたい.またlast year's private たちが行ってきたICKのfunctional analysisをさらに発Showing the shape of hair cells in the inner ear and analyzing the functions of ICK Causes of formation and abnormal function of hair and hairるmolecules メカニズムを明らかにすることをpurpose として research を行った. Private たちはICK owes マウスにおいて, snail's long さがshort していることを见出した. There are hair cell walk-through electronic microscopes, ICK-type scanning electron microscopy, and V-shaped arrays. The apex of immovable hair is the presence of immovable hair, and the regularity of the configuration of immovable hair is chaos. The impact of the ICK's lack of influence is the adjustment of the power. ICK lack of damage to the new baby and death of the adult baby, analysis of the adult baby, ICK floxマウスとInner earにおいてCreを発appearsするトランスジェニックマウスを合け合わせて、コンディショナルノックアウト（CKO）マウスを得た.このICKをInner ear damageさせたマウスをUsing いて, 聴性脳 Dry reaction (ABR) and skewed component ear acoustic emission (DPOAE) をmeasurement すると, ICK CKO's マウスでは聴力のlowly recognizes められた.