インテグリンを制御する細胞骨格蛋白ネットワークの解明と造血器腫瘍治療への応用

控制整合素的细胞骨架蛋白网络的阐明及其在造血肿瘤治疗中的应用

• 批准号: 26461402
• 负责人: 田所 誠司
• 金额: $ 3.08万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26461402/
• 关键词: インテグリン

この研究計画ではインテグリン活性化複合体（IAC）を構成する個々の分子が複合体としてどのようにインテグリンの機能を制御しているかを細胞骨格蛋白ネットワークとしての解析を中心に明らかにすることを目的とする。その中で本年度は、巨核球系細胞株CMKにレンチウイルスベクターsiRNAを用いて、前研究課題で樹立した、talin-1、kindlin-3のノックダウンされた細胞株に加えて、a-actinin、VASP、RACK1などの各分子がノックダウンされたCMK細胞株の樹立を試みた。目的のタンパクのノックダウンには成功したが、細胞自体のviabilityの低下や、インテグリンの活性化を評価する際にコントロールマーカーとして利用する膜糖タンパクGPIbの発現の変化など、解決すべき問題点が残っており、まだ最適な細胞株は得られていない。また、IACを構成する細胞骨格蛋白の機能部位を同定するため、a-actininとインテグリンとの結合部位、ならびにインテグリンの活性化を制御する機能残基をブロックするような膜透過型ペプチドをデザインし、合成した。スクリーニング試験ではウエスタンブロット法での結合の抑制や、フローサイトメトリーでのインテグリン活性化の抑制は確認された。

The research project is to construct a molecular complex called IAC, which controls the function of IAC. This year, we have been trying to establish CMK cell line by using siRNA, talin-1, kindlin-3 and other molecules. Objective: To solve the problem of cell viability, improve cell viability, and evaluate cell viability. The functional site of the cellular protein that constitutes the IAC is determined by the binding site of the a-actin, the activation of the a-actin, and the synthesis of the membrane permeable protein. The inhibition of the binding of the protein in the protein is confirmed by the activity of the protein.