日本における有尾類致死性菌イモリツボカビの初モニタリング研究

日本首次对铀致死真菌蝾螈壶菌进行监测研究

• 批准号: 22KF0320
• 负责人: 富永 篤
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: University of the Ryukyus
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2023
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2023-03-08 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KF0320/
• 关键词: 感染状況; 有尾類

今年度は、西日本を中心にスワブサンプルの収集を行った。沖縄県の沖縄島8地点（南城市＊2地点、うるま市、国頭村＊3地点、大宜味村、名護市）、鹿児島県の徳之島2地点（天城町＊2地点）、同奄美大島4地点（奄美市、龍郷町、大和村、宇検村）、福岡県4地点（北九州市＊3地点、宮若市）、佐賀県3地点（武雄市、唐津市、基山町）で、日本産の有尾類を探し、体表のスワブサンプルの収集を行った。その結果、日本産有尾類8種（オキナワシリケンイモリ、アマミシリケンイモリ、アマミイボイモリ、アカハライモリ、ブチサンショウウオ、チクシブチサンショウウオ、コガタブチサンショウウオ、カスミサンショウウオ）の約330検体サンプルを取得できた。調査した地域には、先行研究で、過去にイモリツボカビが検出されている場所を含めることにより、過去の感染状況との比較ができるようにした。また、一部、飼育されている個体も含まれる。これらのスワブサンプルから市販のDNA抽出キットを用いてDNA抽出物を得た。また、プローブ、プライマー、gBlockを先行研究を参考に作成し、得られたDNA抽出物をもとにqPCRと通常のPCRを用いて、イモリツボカビの感染状況を調査を開始している。当初、これまで使っていた分析機器とは異なることもあり、DNAの検出がうまくいかなかったこともあったが、機器や試薬の調整の結果、精度高く検出が可能な実験系がほぼ確立できた。また、できるだけ広範囲のスワブサンプルの収集を行うべく、各地の研究者にサンプル採集のため依頼を行った。

For this year, にスワブサ, the western Japan を center にスワブサ, プ, を and った published. Okinawa 県 eight locations on Okinawa island (Minami City * 2 locations, うるま city, Kunitou Village * 3 locations, Oimei Village, Nago city), Kagoshima 児 island 県 2 locations on Tokushima island (Tenjo town * 2 locations), Amami Oshima 4 locations (Amami City, Ryu 郷 town, Yamato Village, u検 village), Fukuoka 県4 locations (Kitakyushu City * 3 locations, Miyagi City), saga 県3 locations (Takeo city) (Karatsu city, Kiyama town) で, Japanese species of tail fish を exploration で, surface of the body で スワブサ スワブサ プ で を collection を bank った. そ の results and 8 kinds of Japanese have a tail (オ キ ナ ワ シ リ ケ ン イ モ リ, ア マ ミ シ リ ケ ン イ モ リ, ア マ ミ イ ボ イ モ リ, ア カ ハ ラ イ モ リ, ブ チ サ ン シ ョ ウ ウ オ, チ ク シ ブ チ サ ン シ ョ ウ ウ オ, コ ガ タ ブ チ サ ン シ ョ ウ ウ オ, カ ス ミ サ ン シ ョ ウ ウ オ) about 330 検 の body サ ン プ ル を obtain で き た. Regional survey し た に は, leading research で, past に イ モ リ ツ ボ カ ビ が 検 out さ れ て い を る places including め る こ と に よ り, past の infection status と の is が で き る よ う に し た. Youdaoplaceholder0, one, raising されて る る individuals また containing まれる. Youdaoplaceholder2 れら スワブサ スワブサ プ プ ら ら ら commercially available <s:1> DNA extraction キットを obtained by を て てDNA extract を た. ま た, プ ロ ー ブ, プ ラ イ マ ー, gBlock を を reference に leading research done し, ら れ た DNA extract を も と に qPCR と usually の PCR を using い て, イ モ リ ツ ボ カ ビ の infection status を を start し て い る. At the beginning, こ れ ま で make っ て い た analysis machine と は different な る こ と も あ り, DNA の 検 out が う ま く い か な か っ た こ と も あ っ た が, machine や try 薬 の の adjusted result, high precision く 検 out が may な be 験 department が ほ ぼ establish で き た. ま た, で き る だ け hiroo van 囲 の ス ワ ブ サ ン プ ル の 収 row う を べ く の around, the researchers に サ ン プ ル acquisition の た め in 頼 を line っ た.