Zusammenhänge zwischen Struktur und Funktion der Hollidaystruktur-auflösenden Proteine ENDO VII und CCE1

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Hollidaystruktur-auflösende Enzyme sind sowohl bei der genetischen Rekombination als auch bei der DNA-Reparatur essentielle Bestandteile. Sie binden die DNA als Dimer und trennen das Rekombinationsintermediat durch zwei symmetrische Einzelstrangschnitte in gegenüberliegenden Strängen basengenau auf. Als Produkte entstehen zwei separate, genickte DNA-Doppelstränge. In Kollaboration zwischen den Laboratorien von Dr. Suck in Heidelberg und Prof. Dr. Kemper in Köln soll die Funktionsweise zweier dieser Enzyme, nämlich Endonuklease VII (ENDO VII) des Phagen T4 und CCE1 aus Hefe, aufgeklärt werden. Dazu sollen die Kristallstrukturen der Wildtypproteine bzw. bestimmter Mutanten und ihrer Komplexe mit DNA-Substraten ermittelt und verglichen werden. Parallel dazu sollen mit den gleichen Proteinen und ausgesuchten DNA-Substraten funktionelle Tests auf Dimerisierung, DNA-Bindung und Schnitt durchgeführt werden. Die langjährige Erfahrung der beteiligten Laboratorien für Strukturaufklärung von Proteinen einerseits (Suck), und Analyse biologischer Funktionen von Proteinen andererseits (Kemper), sollen sich hier ergänzen und zu einer möglichst umfassenden Bearbeitung der Fragestellung führen.