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共同的に働く癌遺伝子の解析と新しいヒト癌遺伝子の検索

分析协同作用的癌症基因并寻找新的人类癌症基因

基本信息

批准号：
60015021
负责人：
余郷嘉明
金额：
$ 3.2万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1985
资助国家：
日本
起止时间：
1985 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ヒト胎児線維芽細胞にBKウイルスの変異株pm-522を感染させたところ、トランスフォーム細胞(pmHEF)が得られた。抗血清処理によりBKウイルスを完全に除去したpmHEF細胞からDNAを抽出してマウスNIH373細胞に導入したところ、フォーカスが出現した。フォーカス由来細胞はT抗原陰性だった。2.ヒト胃癌から分離したc-myc遺伝子(RSVのLTRを結合)は単独でラット3Y1細胞をトランスフォームできた。これらトランスフォーム細胞はmyc特異的RNAを非常に多く合成し、軟寒天中でのコロニー形成能があり、ラット新生児に移植すると腫瘍を形成した。また多量のp53蛋白が検出され、p53もトランスフォーメーションに関与していることが示唆された。3.アデノウイルスE1A遺伝子にコードされる2種の蛋白のどちらが細胞DNA合成誘導能を持つかを調べるため、MMTV・LTRの下流に13ScDNAまたは12ScDNAをつないだプラスミドを細胞に導入した。デキサメサゾン投与によりいずれの細胞もDNA合成が誘導されたのでどちらの蛋白も単独でDNA合成誘導能を持つことがわかった。4.アデノウイルスE1A,E1Bまたは両者を同時にNIH3T3細胞に導入したがトランスフォーメーションは起らなかった。全ての細胞で導入したDNAの存在は確認できた。RNAはE1A導入細胞では多量検出されたが、E1B導入細胞では少量しか検出できなかった。以上よりこの細胞ではE1Bの発現が悪いためトランスフォーメーションが起らなかったと考えられる。5.肝癌から癌遺伝子を検出するため、癌細胞DNAを導入したNIH3T3細胞をヌードマウスに移植する方法を試みた。その結果2例の肝癌について腫瘍が形成され、癌遺伝子を検出した。

1. Infection of fetal uterine fibroblast cells, BKウイルスの変 strain pm-522, into させたところ, トランスフォーム cells (pmHEF). Antiserum treatment, BK treatment, complete removal of DNA from pmHEF cells Extracted from the NIH373 cells and introduced them into the cells, and the cells appeared. The cells derived from Fukuro are T-antigen negative. 2. Isolated gastric cancer c-myc residue (RSV LTR combination) and isolated 3Y1 cells were isolated.これらトランスフォームcellはmyc-specific RNAをveryに多くsyntheticし、soft cold The formation of Tianzhong でのコロニーがあり, ラット新児に transplantation するとswelling をformation した. A large amount of p53 protein is released, p53 protein is released, and p53 protein is released. 3. アデノウイルスE1A 缝子にコードされる2 kinds of protein のどちらがcell DNA synthesis induction ability をhold つかを Adjustment べるため, MMTV・LTR's obscene 13ScDNA または12ScDNA をつないだプラスミドをcell に introduced した.デキサメサゾンadministered によりいずれのDNA synthesis inductionされたのでどちらのprotein も単多でDNA synthesis inducing power をhold つことがわかった. 4.アデノウイルスE1A,E1Bまたは両者をsimultaneouslyにNIH3 T3 cells can be introduced into the T3 cells. The presence of DNA introduced into all cells is confirmed. When RNA is introduced into cells, a large amount of E1A will be released, and when E1B is introduced into cells, a small amount will be released, and a large amount will be released. The above よりこのcell ではE1Bの発 appear がいためトランスフォーメーションが出らなかったと卡えられる. 5. Liver cancer can be transplanted into NIH3T3 cells, and cancer cell DNA can be introduced into NIH3T3 cells. As a result, 2 cases of liver cancer were diagnosed, including the formation of tumors and the formation of cancerous remains.