糖タンパク質のミクロ不均一性と糖鎖プロセシングの調節

糖蛋白微观异质性和聚糖加工的调控

• 批准号: 60214032
• 负责人: 堀田 恭子
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Special Project Research
• 财政年份: 1985
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1985 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-60214032/
• 关键词: ミクロ不均一性; 糖タンパク質; HPLC; オブアルブミン; 糖ペプチド; ダンシル; オボトランスフェリン; 個体差

糖タンパク質のミクロ不均一性を定量的に扱う試みを行った。研究の第一段階として各個体よりオブアルブミン(OVA)、オボトランスフェリン(OTF)を分離精製、続いて精製糖タンパク質をコンカナバリンAセファロースカラムにより分画した。OVAからはOA-ODの4画分がOTFからは【CA_(2-4)】の3画分が得られ、いずれの個体もこれら以外の成分を含むことはなかった。各成分比の個体間での変動幅も小さく、こういったミクロ不均一性も一定のコントロールの下に生じると考えられた。一方、分画パターン及び成分比の比較より、同一細胞で合成される両糖タンパク質間には全く相関が認められず両者の糖鎖が独立に形成されることを示している。次段階として、2つの糖タンパク質をプロナーゼ分解し、糖ペプチドを調製、ダンシル化後HPLCでマッピングを行った。OVAからは12個のピーク(1-12)が、OTFからは2個のピークが分離され、OVAピークのうち10と12がOTFのものと一致、両糖タンパク質でその不均一性の程度が全く異なることが判明した。HPLCより得られる各成分とこれまで報告されている糖鎖構造との対応付けを行った結果、クロマト上での各ピークの分離に関し、高マンノース型糖鎖は混合型糖鎖に比しより速く溶出されること、マンノース、N-アセチルグルコサミンが一残基異なる成分は相互に良く分離され、ガラクトース一残基異なるものは隣接するピークを形成する等、その特徴が明らかとなった。ピークの定量的分析の結果、ガラクトース一残基異なる成分の組み合わせ、6と7、8と9、11と12の比の間に個体間で一定の関係が認められた。この結果より、invivoでのこれら成分(6,8,11)の生合成に同一のガラクトース転移酵素が関与していることが推定され、ミクロ不均一性がこのような広い特異性を有する転移酵素により生じる可能性が示された。

The quality of sugar is different from that of sugar. In the first stage of the study, each individual was separated and purified by OVA, OTF and OTF. OVA OA-OD's 4-point OTF [CA_(2-4)]'s 3-point OTF. Each component has a small amplitude and a small heterogeneity. A comparison of the ratio of components and components in a single cell shows that the sugar chain in a single cell is formed independently of the sugar chain in a single cell. The secondary stage is composed of two parts, namely, the sugar phase, the sugar phase and the sugar phase. OVA is divided into 12 parts (1-12), OTF is divided into 2 parts (1-12), OTF is divided into 10 parts (12 - 12), OTF is divided into 2 parts (1 - 12), OTF is divided into 2 parts (2 HPLC analysis showed that all components were separated from each other, and the structure of the sugar lock and the relationship between them were separated from each other. The separation of all components on the surface of the sugar lock was related to the separation of the components on the surface of the sugar lock. The separation of the components on the surface of the sugar lock was related to the separation of the components on the surface of the sugar lock. The separation of the components on the surface of the sugar lock was related to the separation of the components on the surface of the sugar lock. The characteristics of the film are as follows: The results of quantitative analysis showed that there was a certain relationship between the composition of the residue and the ratio of 6 to 7, 8 to 9, 11 to 12. The results show that the possibility of the same enzyme in vivo synthesis of the components (6, 8, 11) is related to the putative, heterogeneous, specific, and possible production of the same enzyme.

项目成果

J.Chromatography. 320. (1985)

J.色谱法。

Comp.Biochem.Physiol.82B-2. (1985)

Comp.Biochem.Physiol.82B-2。

Comp.Biochem.Physiol.82B-3. (1985)

Comp.Biochem.Physiol.82B-3。