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蛋白質高次構造の解析と機能

蛋白质高阶结构分析与功能

基本信息

批准号：
61130005
负责人：
京極好正
金额：
$ 9.28万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至 1988
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61130005/
关键词：
蛋白質の構造解析 NMR X線結晶解析小角散乱電子顕微鏡

项目摘要

1.蛋白質の精密な構造解析、我国で結晶解析がされたSSI(ストレプトマイセスサブチリシンインヒビター)のX線結晶解析の分解能が1.85Aまで上げられた。その結果が1各原子の温度因子の信頼できる数値が得られた。SSIがサブチリシンと複合体を生じると変形を起すが、その変形を記述する方法が考案された。NMRでも精密な構造解析が試みられている。リプレッサー蛋白質croは溶液中で2重体で存在するが、これにオペレーターDNAが結合すると予想に反して2重体構造がゆるむ。上記の2つの結果は分子間相互作用が個々の構造変化を引き起していることを示している。2.巨大な蛋白質の構造解析の手法の開発、巨大な蛋白質には上記のような解析方法は適用し難い。X線小角散乱法がHRPに適用され分子サイズや水和層の厚さが決められた、ミオシン頭部にATPがいかに結合するかという問題があるが、その位置が重原子を含だ特別のATP類似アナログを化学的に結合させ電子顕微鏡で決定された。従来NMRが不得意とする巨大蛋白質の解析にもNMRによるアプローチがされ、IgGとProteinAとの相互作用位量の検出、およびリゾチームモノクローナル抗体とリゾチームの結合様式が実験的に試みられ、静電的パターンによる相互認識機構が提唱された。3.蛋白質の構造の動きと、視覚的にとらえる方法、荷電を帯びた蛋白質分子はどういう因子で結合様式して規則的なクラスターを作るか論じられた。実験的にはピコ??パルスで励走したトリプトファンの蛍光のピーク位量がシフトする。その拡がりの時間依存性を解析して、分子のゆらぎの速い成分、おそい成分に分離して?すことに成功した。蛋白質の構造が解析されても結果を数値やグラフで見ていたのでイフイメージがわか??。それを手軽にパソコンを用いてグラフィック表示する方法が解析されている。手軽で高度なソフトが開発された。

1. The resolution energy of X-ray crystallographic analysis of protein fine structure analysis and Chinese crystal analysis was 1.85A. The result is that the temperature factor of each atom is equal to the temperature factor of each atom. The method of SSI is described in detail. NMR is a sophisticated structural analysis tool. The protein cro is present in solution as a duplex, and the DNA binding is expected to occur as a duplex. The results of the above two experiments show that the molecular interaction is a structural transformation. 2. Development of structural analysis method for giant protein, and application of structural analysis method for giant protein. X-ray small angle scattering method is applicable to molecular structure, water and layer thickness determination, ATP binding in the head, heavy atoms in the position, ATP binding in the chemical structure, electron microscopy determination. The analysis of large proteins by NMR, detection of interaction sites between IgG and ProteinA, and detection of interaction sites between IgG and ProteinA by NMR, detection of interaction sites between IgG and ProteinA, and detection of interaction mechanisms by electrostatic interaction. 3. The structure of protein, the method of vision, the charge factor, the binding factor, the rule of vision, the method of vision実験的にはピコ?? The amount of light emitted by the laser beam is reduced. The time dependence of the molecules is analyzed, and the fast components of the molecules are separated. Success. Protein structure analysis results in numerical values. The method of analysis is used to analyze the content of the paper. It's a great way to open up.