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蛋白質高次構造の解析と機能

蛋白质高阶结构分析与功能

基本信息

批准号：
63111005
负责人：
京極好正
金额：
$ 16.64万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.蛋白質分子構造解析の精密化と蛋白質間識別機構の解明:サブチリシンインヒビター(SSI)の構造解析のデーターがシンクロトロン放射光を使い、1.85Aの精度で得られた。トリプシンとボーマンバーラ型インヒビターABー1との複合体の構造解析が2.3Aの精度で行われた。NMRでもSSIを安定同位体で標識して、^<13>Cや^<15>Nのシグナルを観測することによって、そのシフトから相互作用部位の検出が行なわれた。カリモジュリンのカルシウム結合部位の構造が論ぜられた。2.蛋白質分子集合体の構造解析:精密解折と同じようなシンクロトロン放射光を使ってカエル骨核筋の時間変動が検出された。X線小角散乱を用いてミエロパーオキシダーゼ、アルドラーゼのpHによる集合の解離過程で明らかにされた。X線小角散乱の利用が増している。3.核酸識別蛋白質の構造解析と相互作用位置の検出、転写の調節に関与していると思われる幾種かの蛋白質、λーcro、vecA、CRPおよびOmpRの構造がNMRで解析された。またDNAとも相互作用部位が光CIDNPや、安定同位体標識NMRで行なわれた。4、蛋白質の動的挙動の解析:SSIについて重水素との交換反応から分子内のゆらぎの分布が求められた。ヘム蛋白質の中でヘムがポケットの中で回転する速度が求められた。マイクロ秒以下の速い運動はパルスレーザー励起、蛍光測定で得られる。蛋白質の中のトリプトファンの動きはガラス的であることが示された。5.立体構造の視覚的表示法の開発:X線顕微鏡の開発の努力が続けられている。構造が解折されたデータをパソコングラフィックスで表示する工夫が続けられ、一層研究にとって便利に使用できるようになった。同時に、それを用いて新たに蛋白質分子の内部がのぞけるようになった。

1. The precision of protein molecular structure analysis and the explanation of protein-protein recognition mechanism: the accuracy of 1.85A of structure analysis of SSI was improved. The structural analysis of the complex with the accuracy of 2.3A was carried out. NMR <13>is a method for detecting the presence of stable isotopes and their <15>interaction sites. The structure of the binding site of the compound is discussed. 2. Structural analysis of protein molecular aggregates: precise analysis of the same species, radiation of light, and time evolution of bone and tendon X-ray small angle scattered in the middle of the process of decomposition, the pH of the collection is clear X-ray small angle scatter utilization increases. 3. The structure analysis of nucleic acid recognition proteins and the identification and regulation of interaction sites are related to the structure analysis of several proteins, λ cro, vecA, CRP and OmpR. DNA interaction sites are identified by optical CIDNP and stable isotope NMR. 4. Analysis of protein movement:SSI, heavy water element, exchange, reverse, distribution within molecules, etc. The protein in the middle of the body is very fast. The speed of movement below the second is determined by excitation and luminescence. Protein in the middle of the body, the movement of the body. 5. Development of Visual Representation of Stereoscopic Structures: Efforts to Develop X-ray Microscopes Have Been Delayed. The structure of the system is simple and easy to use. At the same time, the new protein molecules are used in different ways.