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遺伝子DNAを基礎とした蛋白質の機能と構造

基于遗传DNA的蛋白质的功能和结构

基本信息

批准号：
61130003
负责人：
小川英行
金额：
$ 8.77万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Special Project Research
财政年份：
1986
资助国家：
日本
起止时间：
1986 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61130003/
关键词：
RecA蛋白質 PurF蛋白質 RNAポリメラーゼ【H^+】-ATPase gpH gpE UGAサプレッサー機能ドメイン

项目摘要

どの研究もそれぞれ順調に進み、すでに数々の成果が得られつつある。全体を通じての一つの成果は、各蛋白質について遺伝子操作技術を使って機能領域を一次構造の上に限定することに成功したことで、その方法が確立したと見て良い。具体的に次の成果が得られた。RecA蛋白では、N末端から一本鎖DNA結合部位、ATPase活性部位、リプレッサー認識部位、ATP結合部位が順次あると推測され、C末端は一本鎖DNAへの安定な結合を制御し、N末端と相互作用している可能性が考えられた。PurF蛋白質では、グルタミンアミド基転移活性、ATP結合部位、5-ホスホリボシル基転移活性がN末端から並び、これは溝渕が提唱した遺伝子編成理論を裏付けた。RNAポリメラーゼで、ppGppの作用点がβサブユニットのN末端から50〜60%の部位、75%の部位はプロモーター認識の特異性を持ち、σサブユニットを結合してホロ酵素を形成するのにC末端領域が必要であることが明らかになった。【H^+】-ATPaseでは、βサブユニットのArg246がmulti-site加水分解に重要であること、またどの種にも保存されている部位はサブユニットの会合または全構造の集合に関係していることがわかった。λファージの尾の長さを決めるTものさし蛋白質JgpHでは、尾部形成に関与しているのは両端付近で、中央部はDNAの注入と、尾部、頭部の結合に関与していることが明らかになった。また頭部の大きさを決めているgpEには少なくとも5種の機能部位のあることが推測できた。UGAサプレッサーの存在下で形成されるrpsGの蛋白質S7とrplVの蛋白質L22を解析すると、正常蛋白質と共にそれぞれ5個ずつアミノ酸の付加された新しい蛋白質が検出された。UGAサプレッサーを持つとストレプトマイシンに対する抵抗がなくなることから、この新しい蛋白質の働きに興味が持たれている。

The results of this research are in order. All the achievements of this research have been successfully established in the field of functional analysis of proteins. Specific results are obtained. RecA protein contains a DNA binding site at the N-terminal, ATPase active site, ATP binding site, and a DNA binding site at the C-terminal. PurF protein has been theorized to be a protein with high protein activity, ATP binding sites, 5-terminal protein activity, N-terminal protein binding sites, and reverse protein binding sites. The site of action of ppGpp is 50 ~ 60% of the N-terminal region of the β-terminal region and 75% of the N-terminal region of the β-terminal region. [H^+]-ATPase, β- The tail length of the protein JgpH is determined by the tail length and the tail length of the protein JgpH is determined by the tail length and the tail length. There are five kinds of functional parts in the head. In the presence of UGA, rpsG protein S7, rplV protein L22 and normal protein were analyzed. A total of 5 new proteins were detected. UGA offers a wide range of new protein options.