Zwei Target-Strategie zur Hemmung der menschlichen Telomerase

端粒酶是一种RNA-特异性DNA聚合酶，在肿瘤发生时有80- 95%的死亡率，并对他们的潜在疾病有影响。端粒酶是肿瘤治疗的重要靶点。同样，纤维素酶对人体有害。因此，本项目将提供一种新的选择性抑制酶活性的药物。我们首先要研究的是寡核苷酸（ODN），它是通过硫代磷酸酯（PS-ODN）介导的磷酸二酯转化，它不像反义寡核苷酸那样有效，而是通过与端粒酶蛋白相互作用的更高亲和力来与RNA结合。端粒酶是一种极端的端粒酶（Matthes等人，1999).这种结合在前一个项目中需要对端粒酶进行韦尔登、优化和高选择性的测序。主要策略是通过反义寡核苷酸修饰PS-ODN，使其与端粒酶RNA的结合更加完善。Solche chimären Oligonucleotide，mit denen also zwei potentielle Targets der Telomerase getroffen韦尔登靶点（das Protein und die RNA），sind bisher noch necht bekannt，sie sollten aber bezüglich ihrer Wirksamkeit und Selektivität艾伦bisher bekannten Inhibitoren überlegen sein.Zur Prüfung dieser Hypothese schlägt das vorliegende Projekt Entwicklung und Synthese einer Reihe von chimären Oligonucleotiden vor，在PS-ODN和RNA结合寡聚物中，端粒酶活性的最佳选择和选择性增强，可使部分酶活性增强，并可使肿瘤发生。肿瘤培养物将直接诱导寡核苷酸在肿瘤中的端粒酶活性，并将其与Einschätzung möglich相结合，以获得一种潜在的治疗方法，从而在Frage kommen中实现Krebsttherapie。

Die Telomerase ist eine RNA-abhängige DNA Polymerase, die in etwa 80-95 % aller bösartigen Tumoren exprimiert wird und offenbar für ihr unbegrenztes Wachstumspotential entscheidend ist. Die Telomerase wird daher als mögliches Target für eine Krebstherapie angesehen. Wirksame und anwendbare Hemmstoffe dieses Enzyms fehlen bisher.Mit dem vorliegenden Projekt wird eine neue Strategie zur Entwicklung selektiver Inhibitoren dieses Enzyms vorgeschlagen. Sie basiert auf unserem Befund, daß Oligonucleotide (ODN), in denen die Phosphordiesterverknüpfungen durch Phosphorthioate ersetzt sind (PS-ODN), sich nicht wie bei Antisense Oligonucleotiden zu erwarten ist, an die mit der Telomerase fest verknüpfte RNA binden, sondern mit hoher Affinität mit einer Untereinheit des Telomerase Proteins interagieren. Die Folge ist eine extrem starke Hemmung der Telomerase (Matthes et al., 1999).Diese Bindung soll im vorliegenden Projekt mit dem Ziel genauer analysiert werden, optimal wirksame und hochselektive Hemmstoffe der Telomerase zu entwickeln. Die Hauptstrategie ist dabei, die Protein-bindenden PS-ODN durch modifizierte Antisense Oligonucleotide so zu verlängern, daß zusätzlich eine komplementäre Bindung zu der Telomerase RNA erreicht wird. Solche chimären Oligonucleotide, mit denen also zwei potentielle Targets der Telomerase getroffen werden könnten (das Protein und die RNA), sind bisher noch nicht bekannt, sie sollten aber bezüglich ihrer Wirksamkeit und Selektivität allen bisher bekannten Inhibitoren überlegen sein.Zur Prüfung dieser Hypothese schlägt das vorliegende Projekt Entwicklung und Synthese einer Reihe von chimären Oligonucleotiden vor, in denen PS-ODN und RNA-bindende Oligomeren miteinander verknüpft sind und die Komponenten so aufeinander abgestimmt werden, daß eine optimale und selektive Wirkung auf die Telomerase erreicht wird.Diese Strategien werden auf der Ebene des partiell gereinigten Enzyms verfolgt und entsprechend ihrer Eignung auf Tumorzellen übertragen. An Kurzzeitkulturen von Tumorzellen wird die direkte Wirkung geeigneter Oligonucleotide auf die Telomeraseaktivität in Tumorzellen untersucht und damit die Einschätzung möglich, ob sie für einen potentiellen therapeutischen Einsatz zur Krebstherapie in Frage kommen.