カリフラワーモデイクウイルスDNA複製機構に関する研究

花椰菜模型病毒DNA复制机制研究

• 批准号: 61560043
• 负责人: 近藤 博之
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61560043/
• 关键词: カリフラワーモザイクウイルス; 感染; 鋳型; DNA複製; 逆転写

カリフラワーモザイクウイルス(CaMV)をカブ第一本葉に接種、3〜4週間後に収獲した。感染葉から、トリトンX-100,尿素処理,分別遠心法蔗糖密度勾配遠心法等によりウイルスを純化した。純化ウイルスからDNAを抽出し、ポリメラーゼ反応の鋳型とした。DNA合成活性は【^3H】-TTPの酸不溶性画分へのとりこみにより測定した。1.コマツナの健全葉とウイルス感染葉の核と細胞質を分離し、それぞれについてDNAポリメラーゼ活性をみると、鋳型として仔牛胸腺DNA,ウイルスDNAのいずれを用いても、感染葉が健全葉より高い活性をもつことがわかった。それらのいずれの場合も、核の比活性は細胞質の比活性の2〜6倍高かった。2.健全葉の核抽出液は仔牛胸腺DNAを鋳型とするDNA合成活性は認められたが、ウイルスDNAを鋳型とする活性は全く認められなかった。一方、感染葉の核抽出液には、ウイルスDNAを鋳型とする活性は仔牛胸腺DNAを鋳型とする活性の1.5倍高く現れた。3.コマツナまたはカブの感染葉の核抽出液のDNA合成に対するアクチノマイシン-D,RNaseの影響を調べた。100μg/mlのアクチノマイシン-DはDNA合成を26%に低下させた。10μg/mlのRNaseはDNA合成を36%に低下させ、両者が共に存在するときは、DNA合成は全く認められなかった。これらの結果は、(1)ウイルスに感染するとウイルスDNAを鋳型とするDNA合成系が核に主として現れること、(2)このウイルスDNAを鋳型とするDNA合成はRNA合成に依存すること、を示し、逆転写によるDNA複製機構を示唆するものである。

The first copy of the CaMV will be issued after 3 to 4 years of use. Infect people with different concentrations of sugar, urea, sucrose density, sugar density, and so on. Make sure that you don't know what to DNA, and that you don't know what to do. The activity of DNA synthesis [^ 3H]-TTP acid insoluble was determined. 1.