カイコ羽化ホルモンの構造解析

家蚕羽化激素的结构分析

• 批准号: 61560135
• 负责人: 長沢 寛道
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61560135/
• 关键词: 羽化ホルモン; 昆虫ホルモン; カイコ; ペプチドホルモン; アミノ酸配列; 羽化行動; 概日時計

1.カイコ蛾頭部に含まれる羽化ホルモンの単離と構造解析。120万頭のカイコ雄蛾頭部を抽出材料として各種クロマトグラフィーにより精製した結果、最終的に2種類の活性ペプチドを単離した。N末端配列分析の結果、既にわかっていた13残基の配列と全く同じ配列およびN末端のジペプチドを欠く配列をもつことがわかった。2.カイコ蛹頭部に含まれる羽化ホルモンの単離と構造解析77万頭の羽化直前のカイコ蛹頭部を材料としてカイコ蛾頭部からの場合と同様の方法で抽出精製を行い、4種類の羽化ホルモンEH-【I】,【II】,【III】,【IV】を合計50μg単離した。これらはいずれも0.1〜0.3ngの注射で早期羽化誘導活性を示した。逆相HPLC上で【I】と【II】,および【III】と【IV】は極めて近接した位置に溶出された。N末端配列分析の結果、【I】と【III】は同じ配列を、また、【II】と【IV】も同じ配列を示し、前二者は後二者に比してN末端の2残基を欠いた配列であり、N末端から25(23)番目までの配列が明らかとなった。次に、それぞれ、ジスルフィド結合を還元アルキル化した後、【I】と【II】についてはリシルエンドペプチダーゼ、およびV8プロテアーゼで消化し、【III】と【IV】についてはリシルエンドペプチダーゼで消化し、ペプチド断片を得た。それらの配列分析の結果から、ペプチド鎖内部の配列が明らかとなり、N末端から61番目までの配列をつなぐことができた。しかし、現在までのところ、【I】と【III】、および【II】と【IV】の配列上の相違は認められていない。また、他のペプチドホルモンとの相同性は認められていない。1 5 10 15 20 25(Ser-Pro)-Ala-Ile-Ala-Ser-Ser-Tyr-Asp-Ala-Met-Glu-Ile-Cys-Ile-Glu-Asn-Cys-Ala-Gln-Cys-Lys-Lys-Met-Phe- 30 35 40 45 50Gly-Pro-Trp-Phe-Glu-Gly-Ser-Leu-Cys-Ala-Glu-Ser-Cys-Ile-Lys-Ala-Alg-Gly-Lys-Asp-Ile-Pro-Glu-Cys-Glu- 55 60Ser-Phe-Ala-Ser-Ile-Ser-Pro-Phe-Leu-Asn-Lys-

1. Analysis of the structure of the カイコ moth head にまれる feathered ホルモンの単と. The head material of 1.2 million male moths is extracted and various materials are used.ーによりRefined した results, the final に2 types of active ペプチドを単leave. The results of the N-terminal alignment analysis showed that the alignment of the 13 residues is the same.じ配arrayおよびN-terminalのジペプチドをowedく配arrayをもつことがわかった. 2. Structural analysis of the カイイコ pupa head にまれる feathered ホルモの単と structure analysis 770,000 のののカイコpupil head を material としてカイコ moth head からのfield The combined method extracts the refined を行い and 4 types of feathered ホルモンEH-[I], [II], [III], [IV] and a total of 50μg of single ester. The early eclosion inducing activity of これらはいずれも0.1~0.3ng injected has been shown. On reverse phase HPLC, the [I] and [II], the [III] and [IV] are very close to each other and the position is very close to the dissolution. The results of N-terminal alignment analysis, 【I】と【III】は同じalignment を, また, 【II】と【IV】も同じalignment をshowし, the first two The last two residues are the same as the N-terminal 2 residues, the N-terminal 25(23) N-terminal 25(23) N-terminal 2 residues are aligned, and the N-terminal 25(23) residues are aligned. After submerging, submersible, and ジスルフィド, returning to the original アルキル化した, 【I】と【II】についてはリシルエンドペプチダーゼ、およびV8プロテアーゼでdigestionし、【III】と【IV】についてはリシルエンドペプチダーゼでdigestionし,ペプチドfragmentationをgetた. The results of the arrangement analysis and the internal arrangement of the lock are revealed.となり, N-terminal から61st chapter までのmatching sequence をつなぐことができた.しかし、Now までのところ、【I】と【III】、および【II】と【IV】の平行上の contradictory められていない.また、他のペプチドホルモンとのidentityはcognizeめられていない. 1 5 10 15 20 25(Ser-Pro)-Ala-Ile-Ala-Ser-Ser-Tyr-Asp-Ala-Met-Glu-Ile-Cys-Ile-Glu-Asn-Cys-Ala-Gln-Cys-Lys-Lys-Met-Phe- 30 35 40 45 50Gly-Pro-Trp-Phe-Glu-Gly-Ser-Leu-Cys-Ala-Glu-Ser-Cys-Ile-Lys-Ala-Alg-Gly-Lys-Asp-Ile-Pro-Glu-Cys-Glu- 55 60Ser-Phe-Ala-Ser-Ile-Ser-Pro-Phe-Leu-Asn-Lys-