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甲殻類におけるペプチドホルモン-受容体系の共進化と構造機能相関

甲壳类肽激素受体系统的协同进化和结构功能关系

基本信息

批准号：
15208011
负责人：
長沢寛道
金额：
$ 27.37万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

クルマエビの眼柄ペプチドホルモンのうち血糖上昇ホルモン族ペプチド(血糖上昇ホルモン(CHH)および脱皮抑制ホルモン(MIH))について以下の結果を得た。1.CHHのすべての分子が、MIHが有しているN末端から12番目のGlyを有していない。このGlyがCHH活性にとって不要なものか、あるいは逆に活性を低下させるのかを明らかにするために、CHHのうちのひとつCHH-IについてN末端から12番目のGlyを挿入した組み換え体を作製し、そのCHH活性を調べた。その結果、挿入したものは挿入しないものの約1/10の活性しか示さなかった。このことから、このGlyが入らないことが高活性を維持するのに重要であることがわかった。2.CHHの立体構造はこれまでMIHの立体構造に基づいてモデリングで推定されているだけであった。CHHの実際の立体構造を解析するために^<13>Cおよび^<15>NでダブルラベルしたCHH-Iの組み換え体を大腸菌で発現した。この分子は封入体に回収されたので、いったん還元したあとNi樹脂上でリフォールディング反応を行ったが、ラベルしないときは進んだ反応がラベルした分子では同じようには進行しないことがわかった。現在、この反応の収率を上げることを検討中である。3.MIHとMIH受容体の結合について、標的器官であるY器官の膜画分を用いてスキャッチャード解析を行った結果、解離定数Kd=4.76x10^<-10>M、最大受容体結合量Bmax=5.51x10^<-12>Mであると推定された。これらの値は、他の甲殻類で報告されている値とほぼ同程度であった。

The following results were obtained from the following results: blood glucose (CHH), peeling inhibition (MIH), and so on. 1.CHH molecules, MIH molecules, N-terminal molecules, 12 orders, Gly molecules. Gly, CHH activity, Gly activity, Gly activity, CHH activity. The results of the test show that the activity is about 1 to 10 in the first place. In order to maintain the importance of high activity, high activity. 2.CHH stereoscopes are constructed in terms of basic data and MIH data, which are presumed to be inferred. The CHH system is used to analyze the relationship between the two systems and the lt;13>C system. The results show that the CHH-I system is showing signs of infection. In the system, you need to know that there is a negative effect on the Ni, and that you are in the same position as the operator. At present, there is a significant increase in the rate of adverse reactions. The results of the 3.MIH MIH receptor combined with the organ membrane painting of the lt;-12>M receptor were analyzed by the diagnostic instrument. The number of dissociation was 4.76x10 ^ & lt;-10>M, and the maximum binding amount of the capacitor was Bmax= 5.51x10 ^ & the maximum binding capacity of the recipient was presumed. The reports of others and others have been reported to the same extent.