甲殻類におけるペプチドホルモン-受容体系の共進化と構造機能相関

甲壳类肽激素受体系统的协同进化和结构功能关系

• 批准号: 15208011
• 负责人: 長沢 寛道
• 金额: $ 27.37万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15208011/
• 关键词: クルマエビ; 神経ペプチド; 受容体; 共進化; ペプチドホルモン; 脱皮抑制ホルモン; 血糖上昇ホルモン; 甲殻類

クルマエビの眼柄ペプチドホルモンのうち血糖上昇ホルモン族ペプチド(血糖上昇ホルモン(CHH)および脱皮抑制ホルモン(MIH))について以下の結果を得た。1.CHHのすべての分子が、MIHが有しているN末端から12番目のGlyを有していない。このGlyがCHH活性にとって不要なものか、あるいは逆に活性を低下させるのかを明らかにするために、CHHのうちのひとつCHH-IについてN末端から12番目のGlyを挿入した組み換え体を作製し、そのCHH活性を調べた。その結果、挿入したものは挿入しないものの約1/10の活性しか示さなかった。このことから、このGlyが入らないことが高活性を維持するのに重要であることがわかった。2.CHHの立体構造はこれまでMIHの立体構造に基づいてモデリングで推定されているだけであった。CHHの実際の立体構造を解析するために^<13>Cおよび^<15>NでダブルラベルしたCHH-Iの組み換え体を大腸菌で発現した。この分子は封入体に回収されたので、いったん還元したあとNi樹脂上でリフォールディング反応を行ったが、ラベルしないときは進んだ反応がラベルした分子では同じようには進行しないことがわかった。現在、この反応の収率を上げることを検討中である。3.MIHとMIH受容体の結合について、標的器官であるY器官の膜画分を用いてスキャッチャード解析を行った結果、解離定数Kd=4.76x10^<-10>M、最大受容体結合量Bmax=5.51x10^<-12>Mであると推定された。これらの値は、他の甲殻類で報告されている値とほぼ同程度であった。

ク ル マ エ ビ の eyestalk ペ プ チ ド ホ ル モ ン の う ち blood sugar to rise ホ ル モ ン clan ペ プ チ ド (blood sugar to rise ホ ル モ ン (CHH) お よ び peeling inhibit ホ ル モ ン (MIH) に つ い て の results under を た. 1. CHH の す べ て の molecular が, MIH が have し て い る N terminal か ら 12 times eye の Gly を have し て い な い. こ の Gly が CHH active に と っ て don't な も の か, あ る い は inverse に active low を さ せ る の か を Ming ら か に す る た め に, CHH の う ち の ひ と つ CHH -i に つ い て N terminal か ら 12 times eye の Gly を scions into し み た group in え し the を cropping, そ の CHH activity を adjustment べ た. Youdaoplaceholder0 <s:1> result, insert た た <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> な な な な な... approximately 1/10 of the active そ shows さな った った. こ の こ と か ら, こ の Gly が into ら な い こ と が highly active を maintain す る の に important で あ る こ と が わ か っ た. 2. The three-dimensional structure of CHH れまで れまで the three-dimensional structure of MIH に basis づ てモデリ てモデリ グで presumption されて るだけであった るだけであった. CHH の be interstate の three-dimensional structure analytical す を る た め に ^ < 13 > C お よ び ^ < 15 > N で ダ ブ ル ラ ベ ル し た CHH -i み の group in え body を coliform で 発 now し た. は こ の molecules into the sealing body に back 収 さ れ た の で, い っ た ん also yuan し た あ と Ni resin on で リ フ ォ ー ル デ ィ ン グ anti 応 を line っ た が, ラ ベ ル し な い と き は into ん だ anti 応 が ラ ベ ル し た molecular で は じ with よ う に は for し な い こ と が わ か っ た. Now, <s:1> 応 is in the opposite direction of 応, を is in げる, とを検 and とを検. 3. The MIH と MIH by let body の combining に つ い て, target organ で あ る Y organ の membrane points を used い て ス キ ャ ッ チ ャ ー ド parsing line を っ た results, dissociation constant Kd = 4.76 x10 ^ < - > 10 M, the maximum let body combined with Bmax = 5.51 x10 ^ < - > 12 M で あ る と presumption さ れ た. <s:1> れら <s:1> value, he で crustacans で report されて る る value とほぼ to the same extent であった.

项目成果

Structure-activity relationship of crustacean molt-inhibiting hormone from the kuruma prawn Marsupenaeus japonicus

• DOI: 10.1021/bi049433v
• 发表时间: 2004-08-03
• 期刊: BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.9
• 作者: Katayama, H;Ohira, T;Nagasawa, H
• 通讯作者: Nagasawa, H

Complementary DNA cloning and characterization of an additional molt-inhibiting hormone-like peptide from the kuruma prawn Marsupenaeus japonicus

来自日本库鲁玛虾Marsupenaeus japonicus 的另一种蜕皮抑制激素样肽的互补DNA 克隆和表征

• 发表时间: 2005
• 期刊: Peptides 26(2)
• 作者: Tokuda;H.;Tsuyoshi Ohira et al.
• 通讯作者: Tsuyoshi Ohira et al.

Effect of a glycine residue insertion into crustacean hyperglycemic hormone on hormonal activity

甘氨酸残基插入甲壳动物高血糖激素对激素活性的影响

• 发表时间: 2004
• 期刊: Zool.Sci. 21
• 作者: Ito;Y.;宮崎良文;Hidekazu Katayama et al.
• 通讯作者: Hidekazu Katayama et al.

Katayama, H.et al.: "The Solution Structure of Molt-inhibiting Hormone from the Kuruma Prawn Marsupenaeus japonicus"J.Biol.Chem.. 278・11. 9620-9623 (2003)

Katayama，H.等人：“来自库鲁玛虾Marsupenaeus japonicus的蜕皮抑制激素的溶液结构”J.Biol.Chem.. 278・11（2003）。

Shin, T.-W.et al.: "Immunohistochemical and morphological studies of hyperglycemic hormone- and molt-inhibiting hormone-producing cells in the eyestalk of kuruma prawn, Penaeus japonicus, in relation to molting"Invert.Reprod.Develop.. 43・1. 1-8 (2003)

Shin, T.-W.等人：“日本对虾眼柄中高血糖激素和蜕皮抑制激素产生细胞与蜕皮相关的免疫组织化学和形态学研究”Invert.Reprod.Develop.. 43・1。1-8（2003）