卵胞ステロイド生成と卵子成熟の卵胞液性調節因子に関する研究

卵泡类固醇生成和卵母细胞成熟的卵泡体液调节因子的研究

• 批准号: 61570799
• 负责人: 木川 源則
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: 大分医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1986
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1986 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-61570799/
• 关键词: 卵巣; 卵胞成熟; 卵胞ステロイド生成; 卵子成熟分裂; エストロゲン生成; プロゲステロン生成; 卵胞性非ステロイド性調節因子

卵胞のステロイド生成と卵子の成塾分裂停止は卵胞発育と密接な関連をもち、その制御機構は下垂体性ゴナドトロピンと卵胞内のステロイド性および非ステロイド性の3種の調節因子の複雑な相関作用により成り立っている。この機構における卵胞液の役割を明らかにすべく、非ステロイド性調節因子を分離精製しその生理的意義を研究した結果、以下の成果を得た。1.ステロイド生成調節因子の分離精製:ブタ卵巣の小卵胞から卵胞液を採取、限外濾過により分子量5万以下の成分とした後SephadexG-25カラムクロマト法で5分画を得た。invitroおよびinvivo assayにより生物活性を認めたA.B分画をさらにFPLC(逆相分配カラム、0.1%TFAin水と0.1%TFAinAcetritrileの0〜100%濃度勾配法)にて分離した。このうちAの0〜30%Acetonitrileの分画が、FSH.Testosterone(T)存在下、幼若ラット顆粒膜細胞培養系において増加するEstradiol(【E_2】)とProgesterone(【P_4】)生成を抑制した。また214.254.280nmのそれぞれの吸収でこの分画を検討した結果、254nmの吸収が殆どなかったことから核酸ではないということ、214nmの吸収が一番大きいことからペプチドであることが示唆された。。さらに明確にするためにアミノ酸分析及び配列を検討する必要がある。2.ラット顆粒膜細胞におけるステロイド代謝への影響:幼若ラット顆粒膜細胞を無血清培地で12日間培養した結果、ステロイド生成は6日目に最抵となりその後増加を示した。さらに9日目に【^3H】-Pregnenolone(【^3H】-【P_5】)を基質としてFSHあるいはLH存在下にA分画を添加し、TLCにて【^3H】-【P_5】の転換を検討した結果、LH存在下A分画添加群では対称に比し、T及び【E_2】への転換が抵く、【P_4】およびPregnandiol(【P_2】)への転換が著しかった。培地のRIAによる結果においても【P_4】は有意に増加し、【E_2】は測定感度以下であった。以上のことからこの因子は【P_5】→【P_4】→【P_2】及び【P_5】→T→【E_2】酵素系に作用すると考えられた。

The formation of ovum, the cessation of division of ovum, the development of ovum, the close connection of ovum, the control mechanism of pituitary gland There are 3 kinds of regulatory factors in the egg cells that are related to the sex of the egg cells, and the sex is not the same. The results of the research on the physiological significance of the isolation and purification of the non-ステロイド regulatory factors and the results of the following achievements were obtained. 1. Isolation and purification of the regulatory factors for the production of ステロイド: Collect the egg cell fluid from the ovum and filter it with limited external filtration The ingredients with a molecular weight of less than 50,000 are obtained by SephadexG-25 カラムクロマトmethod using a 5-point method. invitroおよびinvivo The biological activity of the biological activity is determined by the A.B separation method using FPLC (reverse phase partitioning method, 0.1% TFA in water, 0.1% TFA in Acetritrile, 0 to 100% concentration blending method) and separation assay.このうちAの0~30% Acetonitrile の发が, in the presence of FSH.Testosterone (T), Yorudo ラット granules In the membrane cell culture system, the production of Estradiol (【E_2】) and Progesterone (【P_4】) was added to suppress the production.また214.254.280nmのそれぞれのAbsorptionでこの画を検questionしたRESULT、254nmのAbsorptionが殆どなかっNucleic acid absorbance at 214nmが一一大きいことからペプチドであることが见憆された. . It is necessary to clarify the analysis and analysis of acid and its arrangement. 2. The influence of the metabolism of the granulosa membrane cells: the serum of the granulosa membrane cells of the young child The results of the 12-day cultivation of the ground, the result of the 6-day cultivation of the ステロイド, the maximum arrival of the となりその, and the subsequent increase of the をshow.さらに9日目に【^3H】-Pregnenolone(【^3H】-【P_5】)をstroma としてFSH あるいはLH in the presence of にA separation をadd し、TLC にて【^3H】-【P_5】のAs a result of 転change を検した, in the presence of LH, the A-drawing group では対says に比し, T and び【E_2】への転changeがarrive,【P_4】およびPregnandiol(【P_2】)への転changed to しかった. The results of Peiji's RIA are as follows: [P_4] is intended to be increased, and [E_2] is not below the measurement sensitivity. The above のことからこのfactorsは【P_5】→【P_4】→【P_2】and び【P_5】→T→【E_2】enzyme system is used as a factor.

项目成果

木川源則: ENDOCRINOLOGIA JAPONICA. 33. 221-231 (1986)

Gennori Kikawa：日本内分泌学。33。221-231（1986）

木川源則: ENDOCRINOLOGIA JAPONICA. 33. 597-604 (1986)

Gennori Kikawa：日本内分泌学 33. 597-604 (1986)