Enzymkatalyse der flavinabhängigen Pyrrol-2-carboxylat Monooxygenasen aus Arthrobacter sp. und Rhodococcus sp.

节杆菌属黄素依赖性吡咯-2-羧酸单加氧酶的酶催化。

• 批准号: 5220151
• 负责人: Dr. Thomas Schräder
• 金额: --
• 依托单位: Institutsbereich Mikrobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5220151?language=en
• 关键词: Enzymkatalyse; der; flavinabh; ngigen; Pyrrol

Der aerobe Abbau von Pyrrol-2-carboxylat wird bei den Gram-positiven Bakterien Arthobacter sp. und Rhodococcus sp. durch eine Hydroxylierung des Substrats zum 5-OH-Pyrrol-2-carboxylat eingeleitet. Diese NADH- und Sauerstoff-abhängige Reaktion wird jeweils von einer flavinabhängigen Monooxygenase katalysiert, die als einzigen Redox-Kofaktor ein FAD besitzt, das direkt an der Substrathydroxylierung beteiligt ist. Bei Arthrobacter sp. wird diese Reaktion von einem Einkomponenten Enzym (60 kDa), bei Rhodococcus sp. von einem Zweikomponenten Enzym katalysiert (54 und 18,7 kDa). Damit gehört letzteres zur kürzlich gefundenen Klasse der flavinabhängigen Zweikomponenten Monooxygenasen. Die vorliegenden Daten für diese Enzyme deuten darauf hin, daß die Art der FAD-Bindung, der Elektronenfluß und damit auch die Enzymkatalyse von der der "klassischen" flavinabhängigen Einkomponenten Monooxygenasen abweicht. In dem beantragten Projekt soll die Funktion der Komponenten der beiden Pyrrol-2-carboxylat Monooxygenasen bei der Enzymkatalyse vergleichend untersucht werden. Nach Aufklärung der Primärstruktur beider Enzyme soll durch molekularbiologische und biochemische Untersuchungen sowie kinetische und spektroskopische Analysen Informationen über das FAD-bindende katalytische Zentrum und den Elektronenfluß bei der Katalyse gewonnen werden.

通过对5-OH-吡咯-2-羧酸的底物进行羟基化处理，获得革兰氏阳性的巴克氏关节炎菌和红球菌。这种NADH-和Sauerstoff-abhängige反应将珠宝从一个黄素单加氧酶催化剂上，通过FAD直接产生一个氧化还原酶-Kofaktor，这是对Substrathydroxylierung beteiligt的影响。节杆菌属（Arthrobacter sp.）和红球菌属（Rhodococcus sp.）分别对60 kDa和54和18.7 kDa的两种组分酶具有催化活性。Damit gehört letzteres zur kürzlich gefundenen Klasse der flavinabhängigen Zweikomponenten Monooxygenasen. Die vorliegenden Daten für diese Enzyme deuten darauf hin，dafabet die Art der FAD-Bindung，der Elektronenfluorescent and damit auch die Enzymkatalyse von der“klassischen”flavinabhängigen Einkomponenten Monooxygenasen abweicht.在本研究中，吡咯-2-羧酸单加氧酶的活性组分在酶催化中的作用非常明显，韦尔登。酶的初级结构通过分子生物学和生物化学研究获得动力学和光谱分析信息，然后由FAD结合的催化剂中心和韦尔登的电子荧光分析仪进行分析。