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巨赤芽球性貧血骨髄細胞における形質発現:分子生物学的手法による検討

巨幼细胞贫血骨髓细胞的特征表达：分子生物学方法研究

基本信息

批准号：
62570535
负责人：
小峰光博
金额：
$ 1.02万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ビタミンB_<12>の欠乏の結果生ずる巨赤芽球性貧血(悪性貧血)では骨髄造血細胞に特徴的な形態異常がみられるが同時に種々な生化学的異常もきたし細胞の早期崩壊につながると考えられる. 生化学的異常は主としてDNA合成障害と関連するものである. B_<12>欠乏は活性葉酸代謝に異常をきたすと同時にメチオニン生成の障害も伴う. メチオニンの相対的欠乏がこれまでに知られているDNA合成異常の一部をおこし得ることを明らかにしたので, 今年度の研究においてはさらに, DNAのメチル化反応に関連した異常について検討し, 以下の成績を得た.1.葉酸およびビタミンB_<12>欠乏メディウムでマウス白血病細胞L1210を培養すると葉酸欠乏状態の細胞が得られる. これを種々なメチオニン濃度として増殖させ, DNA合成障害の出現との関係をみると, メチオニン添加量の多寡により葉酸の必要量が変化し, メチオニン低濃度条件では葉酸欠乏による代謝異常が顕著となった. これはヒト悪性貧血骨髄細胞の観察所見とよく対応するものである.2.メチオニンはメチル基供与体として重要であることから, 低メチオニン状態にあるヒト悪性貧血骨髄細胞DNA中のメチルシトシン比率を測定した. 方法は細胞DNAの調整後, 蟻酸分解して塩基とし, 高速液体クロマトによった. RNA混入のない試料を悪性貧血6例, 急性白血病5例, 対照5例から得た. メチルシトシンの総シトシンに対するモル比はそれぞれ(平均±SD), 3.9±0.2%, 3.9±0.2, 3.8±0.2であり, 悪性貧血で有意に低下するとの知見は得られなかった.3.2と同様の見地からオンコジーンC-mycのメチル化状態をSouthern Blot法で検討した. 制限酵素分解の後エクソンIIIに対するプローブを用いた. 一部の例で低メチル化状態が示唆された.

The results showed that there was a lack of lt;12> in the blood of giant red germ (sexual blood). The morphological characteristics of bone hematopoietic cells were detected in the early stage of biochemistry at the same time. The main body of biochemistry is the barrier to DNA synthesis. There is a lack of active acid substitutes, which is not available. At the same time, it is necessary to cause serious damage at the same time. There is a lack of information on the synthesis of DNA. This year, we have studied the current situation. This year, we have studied the current situation. The following is the result of this year's study. There is a lack of acid deficiency in B _ & lt;12> cell line L1210, leukemia cell line L1210 and acid deficiency status cell. A variety of environmental conditions have been tested, and DNA synthesis has been detected. The amount of acid added depends on the necessary amount of acid. Under the condition of low temperature, low temperature, low temperature I don't know what I saw. I didn't know what I saw. 2. This is the basis for the determination of the percentage of blood cells in DNA. Methods after the cell DNA was rectified, the base was decomposed by acid, and the high-speed liquid was used. 6 cases of acute leukemia, 5 cases of acute leukemia and 5 cases of acute leukemia were mixed with RNA. The average value of SD is 3.9 ±0.2%, 3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0.2,3.9 ±0.2,3.8 ±0. After the enzyme is decomposed, the enzyme is decomposed into III solution. An example of a low-level movie shows that he is in a state of instigation.