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B型肝炎ウイルス表面抗原遺伝子の分子修飾による発現様式の動態-ワクチニアウイルスベクターを用いて-

乙型肝炎病毒表面抗原基因分子修饰的表达模式动态-使用牛痘病毒载体-

基本信息

批准号：
62571005
负责人：
小島朝人
金额：
$ 1.34万
依托单位：
国立予防衛生研究所
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至 1988
项目状态：
已结题

项目摘要

前年度報告した、B型肝炎ウイルス表面抗原(HBsAg)遺伝子が組込まれた組換えワクチニアウイルスをウサギ腎初代培養細胞で連続継代して、遺伝的安定性・挿入遺伝子発現の安定性をHBsAgDNAプローベ、抗HBsAg抗体プローベを用いて検討した。その結果、ウイルスの継代温度(37℃、30℃)に拘らず組換えウイルスは10代継代後においても初代株と同質のHBsAgを発現し、ワクチニアウイルスゲノム中に組込まれたHBsAg遺伝子の欠失・欠損は見出されなかった。次に組換えワクチニアウイルスを動物皮内に接種したところ、接種皮内でのワクチニア抗原の分布にほぼ一致してHBsAgの分布が蛍光抗体法により観察された。これらの動物では接種4日目には100mIU/mlを越える抗HBs、抗体価が誘導され、長期間抗体価が持続していた。他方、組換えウイルス脳内接種による中枢神経系の病変は、弱毒非組換え痘瘡ワクチンウイルス株と同等か、さらに弱いものであった。これに一致して、組換えウイルス接種群の脳内ウイルス感染価は非組換えウイルス接種群より低い傾向が認められた。以上の結果から、遺伝子組換えワクチニアウイルスは親株である痘瘡ワクチン株より病原性が低く、挿入遺伝子を安定に保持・発現し、しかも良好な免疫原性を発揮するためワクチン利用への可能性が示唆された。一方、高等動物細胞の表面抗原であるThy-1遺伝子(cDNA)の細胞外ドメインのみとtransmembrane(TM)ドメインを含む完全なcDNAをそれぞれ組込んだ組換えワクチニアウイルスを作製してThy-1抗原発現を比較したところ、TMドメイン欠失cDNAからは抗Thy-1抗体と反応する産物は検出されず、TMを含むcDNA組換えワクチニアのみ抗Thy-1抗体と反応した。発現されたThy-1抗体は感染細胞表面に分布することから、Thy-1の抗原性発現にはTMドメインが重要な役割を果たしていることが示唆された。

Previous annual report, hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis B surface antigen (HBsAg), hepatitis B surface antigen (HBsAg), kidney primary culture cells, Continuous 続継世して, the stability of the remaining 伝・insert the stability of the remaining 缝子発 appear をHBsAgDNAプローベ, anti-HBsAg antibody プローベを用いて検した. The result of その, ウイルスの継継 temperature (37℃, 30℃) に氉ず group replacement えウイルスは 10 generations after 継generation においても the first generation strain is homogeneous HBsAgを発appearsし、ワクチニアウイルスゲノム中に组込まれたHBsAg伝子の无码・无码は见出されなかった. Intradermal inoculation of animals, intradermal inoculation of animals The distribution of the antigen is consistent and the distribution of HBsAg is consistent with the photoantibody method. The animals were vaccinated for 4 days with 100mIU/ml anti-HBs, antibody induction, and long-term antibody maintenance. Other prescriptions, intravenous inoculation of intravenous inoculation of the central nervous system, attenuated virus, etc. The group is changed to え acne sore ワクチンウイルス strain と equal か, さらに weak いものであった.これに unanimous して, group replacement えウイルス inoculation group の脳内ウイルス infection 価は non-group replacement えウイルス vaccination group よりlow い tendency がidentification められた. The results of the above are that the pathogenicity of the parent strain of the parent strain of the であるpox sore strain of the えワクチニアウイルスは parent strain is low, and the insertion of the legacy伝子を stable and stable maintenance・発appearsし、しかもGood immunogenicityを発水するためワクチン Utilization possibilityがshows instigationされた. On the one hand, the surface antigen of higher animal cells, Thy-1 gene (cDNA), the extracellular DNA smembrane (TM) full cDNA cDNAスをして Thy-1 antigen is present and compared したところ, TM ドメイン无码からは anti-Thy-1 antibody The anti-anti-Thy-1 antibody and the anti-Thy-1 antibody of TM contain cDNA assembly. The distribution of Thy-1 antibodies on the surface of infected cells and the distribution of Thy-1 antibodies The antigenicity of the disease is important and the disease is important.