がん遺伝子の検出と機能解析

癌基因检测及功能分析

基本信息

批准号：
62614507
负责人：
豊島久真男
金额：
$ 16万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.c-yes関連遺伝子では, c-farの5末端側のCDNAクローニングに成功し, 全構造を明らかにした. c-yes fynについてはプロモーター領域の構造解析を行った. lynについては, 特異抗体を作用して, lyn蛋白質がチロシンキナーゼ活性を有していることを示し, 更にB-リンパ球で発現していることを見い出した. 抗yesモノクロナール抗体の作成にも成功し, 抗fyn, 抗fgr抗体の作成ももう一歩の所まできている. これら抗体を用いて, yes関連遺伝子物産の組織での発現検索が可能となってきた.2.c-erbB2が分化度の高い胃癌(管状腺癌)や進行度の乳癌で偏って増幅していることを見い出した. 腺癌以外では脳腫瘍(星状細胞腫)で遺伝子増幅を見い出した. 特異抗体を用いた研究からc-erbB2蛋白質が胃癌細胞の微械毛に局在していることやEGFレセプターによって, そのチロシン残基がリン酸化されることを見い出した. 更にc-erbB2の転写プロモーター領域を解析した.3.NIH13T3細胞への遺伝子導入実験から得られた新たなトランスフォーミング遺伝子が, c-rofに類似した遺伝子であることを見い出し, これをB-rafと命名した. C-raf同様, B-rofも5側での組み換えによって活性化されることを示唆する結果を得た. 更に, B-rafが種々のヒト癌細胞で発現していることから癌との係わりが示唆された.4.erbAに関連する細胞遺伝子4種(ear-1, ear-2, ear-3, ear-7)を見い出しそのCDNAクローンの構造解析を完了した. ear-1とear-2が酷似した蛋白質をコードすこと又ear-1とear-7が染色体上極めて近い位置に存在し, 可成りの胃癌で増幅していることを見い出した.5.癌遺伝子と癌原遺伝子の構造解析から, 特異抗体を用いた機能解析に重点が移ってきた. 更に転写支配因子や発現ベクタを用いた新種癌原遺伝子の腫瘍形成能の解析が可能となってきた.

1。在与C-YES相关的基因中，cDNA成功克隆在C-FAR的5末端，揭示了整个结构。对于C-YES FYN，我们对启动子区域进行了结构分析。对于Lyn，使用特异性抗体证明Lyn蛋白具有酪氨酸激酶活性，并进一步发现它是在B淋巴细胞中表达的。我们还成功地创建了抗-YES单克隆抗体，并更进一步创建了抗F-Fyn和抗FGR抗体。使用这些抗体，可以在与是相关的基因产物的组织中搜索表达。 2。我们发现C-ERBB2在高度分化的胃癌（管状腺癌）和晚期乳腺癌中得到扩增。除腺癌外，在脑肿瘤（星形细胞瘤）中还发现了基因扩增。使用特定抗体的研究表明，C-ERBB2蛋白定位于胃癌细胞的微毛，酪氨酸残基被EGF受体磷酸化。此外，分析了C-ERBB2的转录启动子区域。 3。发现从基因转移实验到NIH13T3细胞中获得的新转化基因被发现是类似于C-ROF的基因，并且被称为B-RAF。与C-RAF相似，我们获得了结果，表明B-ROF也通过5侧的重组激活。此外，B-RAF在各种人类癌细胞中表达，表明其与癌症的关系。 4。我们发现了与ERBA（EAR-1，EAR-2，EAR-3，EAR-7）有关的四个细胞基因，并完成了cDNA克隆的结构分析。我们发现EAR-1和EAR-2编码非常相似的蛋白质，并且EAR-1和EAR-7位于染色体上非常接近，并且它们会在可能的胃癌中扩增。5。从致癌基因和原始基因的结构分析中，重点已转移到使用特定抗体的功能分析。此外，使用转录控制因子和表达载体分析新原始基因的致瘤潜力已有可能。