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酵母における細胞複製の制御

酵母细胞复制的控制

基本信息

批准号：
62615507
负责人：
宇野功
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1987
资助国家：
日本
起止时间：
1987 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62615507/
关键词：
酵母細胞増殖イノシトールりん脂質

项目摘要

イノシトールりん脂質の細胞機能における役割, 特に細胞複製における役割について研究を行った. イノシトールりん脂質に関与する突然変異株を分離するためにイノシトールりん脂質に対するモノクローナル抗体を作製し, その抗体を電気穿孔法を用いて細胞またはプロトプラスト化した細胞を処理することによって, その抗体に感受性株を単離する方法で開発した. イノシトールりん脂質の中でキーサブスタンスはPIP2であることから, まずPIP2に対する抗体を常法に従って作製した. そしてこの抗体で細胞を処理すると細胞は一時的に増殖を停止する. イノシトールりん脂質の哺乳動物の研究結果から類推すると, 細胞周期のG1期に必要ではないかと考えられた. そこで温度感受性でG1期に停止する突然変異株を多数分離した. これらの株について抗体に対する感受性を調べた結果, 感受性になった株が5種類と耐性になったが1種類単離することができた. 感受性株の内2種類の株は制限温度下でPIP2を電気穿孔法により細胞に導入してやると細胞増殖が回復した. この結果はPIP2が細胞増殖に必要であることを示している. さらに哺乳動物ではイノシトールリン脂質代謝について解析が進みつつあるが不明な点が多い. 酵母においてもその生化学的性状を明らかにする必要があるので, PIからPIPを合成するPItinose, PIPからPIP2を合成するPIPkniseの活性の測定法を確立した. またこの逆反応を行うホスファターゼについても同様に行った. さらに中間代謝産物の定量法をも確立し, イノシトールりん脂質の代謝を追究することが可能になった.

The cell function of lipid is studied in detail, especially in cell division. A method for isolation of antibody-susceptible strains using electroporation of cells and lipid related proteins has been developed. In the middle of the inositol lipid, there is a drop in PIP2, which shows that the antibody against PIP2 is produced in the usual way. The cell proliferation was stopped by the antibody. The results of mammalian studies on lipids are similar to those of the G1 phase of the cell cycle. Most of the plants were isolated when temperature sensitivity stopped at G1 stage. The sensitivity of these strains was adjusted to 5 species and 1 species. Two species of susceptible plants were introduced into the cells by electroporation under limited temperature, and then the cells were regenerated. The results of PIP2 are necessary for cell proliferation. In mammals, the lipid metabolism is analyzed in detail. To establish a method for determining the activity of PIPknit in the synthesis of PIPinose and PIP2 in yeast. This is the first time I've ever seen a woman who's had sex with a child. A quantitative method for the determination of intermediate metabolites was established, and lipid metabolism was investigated.