Streptococciの輸送性ATPaseのH^+生化学的, 遺伝学的研究

链球菌转运 ATP 酶的 H^+ 生化和遗传学研究

• 批准号: 62617505
• 负责人: 小林 弘
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Chiba University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1987
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1987 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-62617505/
• 关键词: Streptococci; H^+輸送性ATPase; ph調節; H^+輸送性ATPaseの変異株

1.Streptococcus FaecalisのH^+輸送性AT Paseの生合成は低いpHで促進される. この促進は本酵素の役割である細胞内pHを調節するためには必須であると考えられている. まずこの点についてコンピューターシュミレーションを行なった. その結果, 低いpHで本酵素が促進されないかぎり細胞内pHは一定に保たれないことがわかった.2.次に、この生合成の促進がいかなくなった変異株の分離を試み、目的とする変異株を分離することができた。この変異株(AS17株)では、pHの低下によりH^+輸送性AT PaseのF_o部分はその生合成が促進されるが、F^1部分はまったく促進されなかった。その結果、低いpHで増殖している本変異株の細胞膜にはF^1部分を欠いたF^o部分が蓄積し、H<+>の膜透過性が高くなっていた。以上の結果は、他の細菌と異なり、S.faecalisのH<+>輸送性A T PaseはF^1とF^o部分が別々の調節単位として存在していることを示唆している。3.上記の変異株(AS17株)を分離する過程で新しい変異株(AS8株)が分離できた. AS8株のH^+輸送性ATPaseはF^o部分の変異によりATPは加水分解できるがH^+輸送性がないことがわかった. また, F^1とF^oの結合力は野性株とほぼ同じであった. このように, AS8株はH^+輸送性ATPaseが構造的には野性株と同じであるにもかかわらず, F^1とF^o部分が機能的に共役していない極めて興味深い変異株である.4.S.faecalisのH^+輸送性ATPaseの遺伝子のクローニンクを大腸菌および大腸菌のベクターを用いて行なったがクローンは得られなかった. 今後へ別の系を用いてクローニングを行なわなければならないと思われる.

1. Streptococcus Faecalis の H ^ + transport sex AT Pase の biosynthesis は い low pH で promote さ れ る. こ の promote は this enzyme cut で の service あ る intracellular pH を adjust す る た め に は must で あ る と exam え ら れ て い る. ま ず こ の point に つ い て コ ン ピ ュ ー タ ー シ ュ ミ レ ー シ ョ ン を line な っ た. そ の results, low pH で い this enzyme が promote さ れ な い か ぎ り intracellular pH は certain に protect た れ な い こ と が わ か っ た. 2. に, こ の biosynthesis の promote が い か な く な っ た - try different strains の separation を み, purpose と す る - different strains を separation す る こ と が で き た. こ の - different strains (AS17 strains) で は, low pH の に よ り H ^ + transport sex AT Pase の F_o part は そ の biosynthesis が promote さ れ る が, F ^ 1 part は ま っ た く promote さ れ な か っ た. そ の results, low pH で い raised colonization し て い る this - different strains の membrane に は F ^ 1 part を owe い た ^ o F some が accumulation し, H < + > の membrane permeability が high く な っ て い た. は の results above, he の bacteria と different な り, s. aecalis の H A T < + > conveying sex Pase は と F ^ ^ 1 o F some が don't 々 の adjust 単 A と し て exist し て い る こ と を in stopping し て い る. 3. Written の - different strains (AS17 strains) を separation す る process で new し い - different strains (AS8 strains) が separation で き た. の AS8 strain H ^ + transport sex ATPase は ^ o F some の - different に よ り は ATP hydrolysis で き る が H ^ + transport sex が な い こ と が わ か っ た. ま た, F ^ o ^ 1 と F の binding force は wild strains と ほ ぼ with じ で あ っ た. こ の よ う に, AS8 strains は H ^ + transport sex ATPase が constructed に は wild strains と with じ で あ る に も か か わ ら ず, と F ^ ^ 1 o F some し が function に total service て い な い extremely め て tumblers deep い - different strains で あ る. 4. S. aecalis の H ^ + transport sex ATPase の posthumous son 伝 の ク ロ ー ニ ン ク を coliform お よ び coliform の ベ ク タ ー を with い て line な っ た が ク ロ ー ン は have ら れ な か っ た. Future へ don't の is を use い て ク ロ ー ニ ン グ を line な わ な け れ ば な ら な い と think わ れ る.

项目成果

Takashi Suzuki: J.Biol.Chem.

铃木隆：J.Biol.Chem。