がん抗原としのムチン型糖タンパク質の特性

粘蛋白型糖蛋白作为癌抗原的特性

• 批准号: 63015043
• 负责人: 山科 郁男
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63015043/
• 关键词: 単クローン抗体; ムチン糖鎖; がん抗原; Tn抗原; ヒツジ顎下腺ムチン(OSM); 結腸がん

細胞の癌化に伴い細胞表面の糖鎖構造に異常をきたすことが知られている。癌化に伴う糖鎖異常を的確にとらえる単クローン抗体は癌の診断や治療などの臨床面で極めて有用である。本研究者らは特に糖蛋白質糖鎖に対する単クローン抗体の作成法を開発し、数多くの抗体を得た。今回ヌードマウスに担癌させたLS180を免疫原として新たに11種の単クローン抗体の作成に成功した。この中の1つ、MLS128はLS180のムチン型糖ペプチドと反応するが、血清型糖ペプチドや糖脂質とは反応しない。また本抗体は以前当研究室で作成した癌関連糖鎖抗原を認識する単クローン抗体MLS102と同様、羊顎下腺ムチン(OSM)と強く反応した。しかし、シアリダーゼにより、抗体結合性は影響をうけないことから本抗体はMLS102と異なるエピトープを認識していると考えられた。またα-N-アセチルガラクトサミニダーゼやプロナーゼによりOSMとの反応性が著しく低下することから本抗体のエピトープには糖とペプチドの両方が関与することが予想された。さらに詳細なエピトープの構造を知るためアシアロOSMから抗体と結合するフラグメントをMLS128-アフィニティカラムとHPLCを用いて単離した。本抗体と結合する最小のフラグメントはサーモリシン消化により単離されたGP-2で、そのアミノ酸配列は、Leu-X-Glu-X-X-X-Gln-Leu-Proと決定された。これは以前Hillらが報告したOSMのアポムチンのトリプシン消化物、Tlフラグメントの一部であった。Xの位置はSerまたはThrにGalNAcの残基がα結合していると考えられ、特に3箇所連続してGalNAc残基がペプチド鎖上に並ぶ構造がML S128との結合に重要な部分であることが推定された。Tn赤血球のグリコホリンAは本抗体と反応するが、そのN末付近には、GP-2と類似の構造が存在する。

Cell carcinogenesis に accompanied by に abnormal <s:1> glycolock structure on the <s:1> cell surface を たす る とが とが とが is known as られて る る る. Canceration に with abnormal う sugar lock を indeed に と ら え る 単 ク ロ ー ン antibody の は carcinoma diagnosis や treatment な ど の clinical surface で extremely め て useful で あ る. The researchers ら は, に sugar protein sugar lock に す seaborne る 単 ク ロ ー の done ン antibodies を open 発 し, more く の antibody を た. Today back ヌ ー ド マ ウ ス に bear carcinoma さ せ た LS180 を immunogen と し て new た に 11 の 単 ク ロ ー ン antibody の made に successful し た. こ の の 1 つ, MLS128 は LS180 の ム チ ン type sugar ペ プ チ ド と anti 応 す る が, serotype sugar ペ プ チ ド や sugar lipid と は anti 応 し な い. ま た は when laboratory で done before the antibody し た carcinoma masato even sugar lock antigen を know す る 単 ク ロ ー ン antibody MLS102 と with others, sheep under the jaw gland ム チ ン (OSM) と く reverse 応 し た. し か し, シ ア リ ダ ー ゼ に よ り, antibody combining は influence を う け な い こ と か ら this antibody は MLS102 と different な る エ ピ ト ー プ を know し て い る と exam え ら れ た. ま た alpha N - ア セ チ ル ガ ラ ク ト サ ミ ニ ダ ー ゼ や プ ロ ナ ー ゼ に よ り OSM と の が 応 sex that し く low す る こ と か ら this antibody の エ ピ ト ー プ に は sugar と ペ プ チ ド の struck party が masato and す る こ と が to think さ れ た. Detailed な さ ら に エ ピ ト ー プ の tectonic を know る た め ア シ ア ロ OSM か ら antibody と combining す る フ ラ グ メ ン ト を MLS128 - ア フ ィ ニ テ ィ カ ラ ム と HPLC を with い て 単 from し た. This antibody と combining す る minimum の フ ラ グ メ ン ト は サ ー モ リ シ ン digestion に よ り 単 from さ れ た GP - 2 で, そ の ア ミ ノ acid with は, Leu - X - Glu - X - X - X - Gln - Leu - Pro と decided さ れ た. こ れ は Hill before ら が report し た OSM の ア ポ ム チ ン の ト リ プ シ ン digestion, Tl フ ラ グ メ ン ト の a で あ っ た. Position X の は Ser ま た は Thr に GalNAc の residues が alpha combining し て い る と exam え ら れ, に even by three 続 し て GalNAc residues が ペ プ チ ド locked に and ぶ tectonic が ML S128 と の な important part combining に で あ る こ と が presumption さ れ た. In Tn red blood cells, there is A <s:1> グリコホリ と a する antibody と anti応 するが, そ <s:1> n-terminal nearly に する, and GP-2と similar <s:1> structure が present する.