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酵素触媒反応による有機酸のボルタンメトリー

通过酶催化反应测定有机酸的伏安法

基本信息

批准号：
63540434
负责人：
長谷部清
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

有機酸の特異的分析法として、高選択的である酵素触媒反応を利用し、高感度な検出法としての微分パルスポーラログラフィーを用いた新しい分析法を開発した。本研究では、有機酸としてクエン酸を選んだ。クエン酸は生体における代謝系としてのTCA回路の重要な中間体であるばかりでなく、食品工業における添加物、建築業界におけるセッコウの凝結遅延剤、助晶剤などに広く用いられている。電気分析的に不活性なクエン酸を2種類の酵素、すなわち、クエン酸リアーゼおよびオキサロ酢酸デカルボキシラーゼを同じ溶液に共存させ、クエン酸に作用させ、ピルビン酸に変換する。生成したピルビン酸を電気化学的に還元し、このとき得られる還元電流の濃度依存性を検討した。以下に反応式を示す。クエン酸〓DBクエン酸リアーゼ(/)→〓DBオキサロ酢酸オキサロ酢酸〓DBオキサロ酢酸デカルボキシラーゼ(/)→〓DBピルビン酸ピルビン酸〓DBH〓DI+〓DI,E〓DI-〓DI(/)→〓DB乳酸過剰量の酵素は、電気分解の際に電極に吸着し、ピルビン酸の還元反応を妨害するので、あらかじめ反応終了後、過塩素酸イオンの添加により除去した。クエン酸のピルビン酸への変換における反応時間および反応温度の関係は、0.2Mトリス-酢酸緩衝溶液(pH7.8)において35℃では20分以上で、また温度以外の条件を一定にして反応温度を変化させたとき、30〜40℃で定量的に変換された。さらに、ピルビン酸への変換のための最適pH領域は7.0〜8.6の広い範囲であった。電解過程における条件では、電解液のpHは3.8〜4.2で電解電流は最大かつ一定であり、緩衝能を考慮して0.2mとした。電位掃引速度は、5mV/S、パルス電圧は100mVが最適であった。確立した条件下で0.5〜20μMのクエン酸の定量が可能であり、本法を市販セッコウおよびスポーツドリンク中のクエン酸の定量に応用し、好結果が得られた。

There is a special method for the analysis of acid, the highly selected enzyme catalyst is used for the reverse use of the enzyme catalyst, and the method of high sensitivity is used for the determination of differential analysis. the new analytical method is used. In this study, there is no significant difference between acid and acid. The main components of the TCA circuit are the food industry, the food industry, the industry and the industry. The inactive enzyme, sulfonic acid, sulfonic acid, sulfuric acid, In this paper, the chemical reduction of acid electrochemistry is generated, and the temperature dependence of current is very important. The following is a "reverse" display. Acid, DB, acid, DBH, DI+, DI, acid, DI+, acid, acid, E-DI- DI (/) to determine the amount of lactic acid lactate enzyme enzyme, electrolyser, electrophoretic acid, anti-lactic acid, anti-lactic acid, lactate, lactic acid, lactic acid, lactic acid The temperature and temperature of the solution (pH7.8) are 35 ℃ and 20 min, the temperature temperature is 30 ℃ and 40 ℃, the temperature is 30 ℃ and 40 ℃. This is the most important part of the pH field. This is the most important area in the world. The operating conditions of the process and the pH of the solution are 3.8m and 4.2m, respectively. The maximum current of the solution must be high, and the maximum temperature of the current must be 0.2 m. Electric potential lead speed, 5mV/S, electric power, electric power, electric 100mV, electric potential lead speed, 5mV/S, electric potential lead speed, electric potential Make sure that under the condition of 0.5 ~ 20 μ M, it is possible to determine the quantity of acid. this method can be used to determine the amount of acid in the market.