海藻レクチンの1次構造に関する研究

海藻凝集素一级结构的研究

• 批准号: 63560205
• 负责人: 堀 貫治
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 1989
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560205/
• 关键词: 海藻レクチン; 単離; N末端アミノ酸配列

当初計画では、63年度に紅藻カギイバラノリレクチンの、64年度に紅藻ミリンレクチンの各単離と1次構造解析を行う予定であったが、63年度に上記両レクチンの単離を行うとともに、新たに紅藻シラモレクチンの単離を行い、64年度にこれらレクチンの1次構造解析を行うよう計画変更した。すなわち、63年度は以下の研究実績にとどまった。カギイバラノリ、ミリンおよびシラモの各藻体を採集し、凍結乾燥後粉末とした。カギイバラノリの粉末藻体から50%エタノール抽出、エタノール沈澱、ゲル濾過、逆相およびゲル濾過HPLCにより同レクチン、Hypmin Aを単離した。次に、ミリンの粉末藻体から50%エタノール抽出、エタノール沈澱、ゲル濾過およびイオン交換HPLCによりミリンレクチン3種、Solnins A,BおよびCを単離した。最後にシラモの粉末藻体から50%エタノール抽出、硫安塩析、Asiolofetuin-CellulofineアフィニティークD2トグラフィーおよびゲル濾過HDLCによりシラモレクチン、Granin-Bを単離した。これら精製レクチンはいずれも等電点電気泳動上単一であった。そこで、次に、Solnins A,BおよびCとGranin-BのN末端アミノ配列を自動プロテインシーケンサーを用いて検討した。その結果、Solnins A,BおよびCのN末端30残基の配列は、3種ともGRYTVQNWGGS SAAWNDAGLWVLGSKANQで全く同じであった。さらに、Granin-BのN末端25残基の配列は、()RYTVQNWGGSSA()WN()AGL()VL()Sで、先のミリンレクチンの同配列とほとんど同じであった。このように、海藻2種からの計4種レクチンはほとんど同じN末端アミノ酸配列を有していることが判明した。これらの配列は、互いに相同性を示す陸上植物レクチンのN末端アミノ酸配列と明らかに異なっており、海藻レクチンの全1次構造解明はレクチンの分子進化を考察する上でも極めて興味ある課題となった。

The original plan, the year 63, the year, the year and the year. The following studies will be conducted in the following years. Make sure that the algae are collected and dried. 50% of the powdered algae were extracted, precipitated, recovered, and the reverse phase was detected by HPLC. The Hypmin A was isolated. In the second phase, 50% of the powdered algae were extracted, the powder was precipitated, the HPLC was transferred to each other, and the Solnins Agraine B was isolated from each other. In the end, 50% of the powdered algae were extracted, thioampere was analyzed, Asiolofetuin-Cellulofine was extracted, D2 was isolated, and Granin-B was isolated by HDLC. Please make sure that the electrophoretic swimming activities such as the electric spot, such as the electric spot, do the best work in a short time. The automatic equipment is assigned to the terminal of the Granin-B in the first place, the second, the second, and the second, the second, the third, the second, the second, the second, The results of the experiment were as follows: Solnins A, B, C, N-terminal 30 residues, 3 kinds of GRYTVQNWGGS SAAWNDAGLWVLGSKANQ, all of them were identical. Configuration of 25 residues at the N-terminal of Granin-B, () RYTVQNWGGSSA () WN () AGL () VL () S, and so on. Two kinds of fish, two kinds of seaweed, four kinds of fish, the same as the N-terminal carboxylic acid, there are two kinds of fish, seaweed and seaweed. The results show that the plants are connected with each other, and the N-terminal acids are arranged in the plant. The algae and seaweed are all tested once to understand the molecular evolution of the plant.