紅藻カギイバラノリレクチンの糖鎖認識と生体膜レセプターに関する研究

红藻Kagiibara海苔凝集素糖链识别及生物膜受体研究

• 批准号: 08660251
• 负责人: 堀 貫治
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08660251/
• 关键词: レクチン; 紅藻; 認識糖鎖構造; 赤血球膜; レセプター

紅藻カギイバラノリレクチンが認識する糖鎖構造を、30種の蛍光標識糖鎖(複合型8種、高マンノース型5種、混成型6種、N-グリカン共通コアペンタサッカライド、共通コア類似糖鎖1種、その他9種)を対象とし、レクチンカラム法および平衡透析法を用いて調べた。前者の方法(固定化レクチン)においては、いずれの糖鎖もカギイバラノリレクチンカラム(固定化レクチン量1mg/mlゲル、4x50mm)に結合しなかった。後者の方法(遊離レクチン)においても、4種の糖鎖を除く他の供試糖鎖との結合性は認められなかった。共通コア類似糖鎖1種と糖脂質由来の糖鎖3種が弱い結合性を示したが、結合率が低いことと結合しなかった糖鎖構造との比較から、本レクチンが認識する糖鎖構造を特定するには至らなかった。また、本レクチンは試験した5種の生体膜脂質成分とも結合しなかった。一方、本レクチンの赤血球凝集作用は、N-グリカンを有する糖タンパク質およびその糖ペクチンで阻止される。以上の結果から、本レクチンは供試糖鎖以外の糖鎖構造および/あるいは糖ペプチドのペプチド部分に親和性をもつことが示唆されたが、その点を明らかにするには至らなかった。本レクチンはトリプシン処理ウサギ赤血球とその膜標品を強く凝集すること、その凝集活性は膜標品の糖タンパク質画分で阻止されることを認めた。そこで、ビオチン化カギイバラノリレクチンを調整し、同赤血球膜の糖タンパク質性レセプターをウエスタンブロット後のレクチン染色により調べ、4種の糖タンパク質性レセプターを検出した。これらレセプターの糖鎖構造の解析は現在進行中である。同解析が終了後、リンパ球膜レセプターの同定とその糖鎖構造解析を行う予定である。

30 kinds of fluorescent labeled glycocks (8 kinds of complex type, 5 kinds of high type, 6 kinds of mixed type, N-type common type, 1 kind of common type, 9 kinds of other types) were used in the adjustment of sugar lock structure of red algae, and the balance dialysis method. The former method (immobilization) is characterized by the combination of the two methods (immobilization amount 1mg/ml, 4 x 50mm). The latter method (free chain) is used to eliminate the four kinds of sugar chains, and the other kinds of sugar chains are used to identify the binding properties. Common sugar chain similar to sugar chain 1 kind of sugar lipid origin of sugar chain 3 kinds of weak binding rate low binding rate sugar chain structure comparison, this kind of sugar chain structure recognition specific 5 kinds of lipid components of the body membrane were combined with each other. In one aspect, the hemagglutination of the protein is prevented by the presence of N-glucuronidase and the presence of glucuronidase. The above results show that the structure of sugar locks other than the sugar locks tested is different from that of the sugar locks tested. The present invention relates to a method for treating red blood cells and membrane markers with high agglutination activity, and to a method for preventing membrane markers from being separated with glucose. In addition, we can adjust the sugar content of erythrocyte membrane, and detect the sugar content of erythrocyte membrane. The analysis of the sugar lock structure of this paper is in progress. After the same analysis, the spherical membrane is separated from the sugar lock structure.