鶏における腫瘍増殖関連糖蛋白質(105Kgp)産生機構解析のための基礎的研究

解析鸡肿瘤生长相关糖蛋白（105Kgp）产生机制的基础研究

• 批准号: 63560289
• 负责人: 松田 治男
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Hiroshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63560289/
• 关键词: 鶏細胞増殖因子; 105Kgp; 酵素免疫組織化学的法

1.105Kgpのinvitroにおける細胞増殖活性の種特異性をしらべたところ、14種の異種細胞に対する増殖活性は認められず、鶏細胞とくに胎児細胞や鶏細胞株に対してその活性が認められた。2.培地への添加105Kgpの量に依存した2峰性の増殖パターンは、モノクローナル抗体を用いてアフィニティ精製した105Kgkpにおいても認められ等電点の異なる105Kgpが2峰性増殖パターンに影響している可能性を示唆する成績が得られた。3.MSB1-41C細胞株の105Kgp産性誘導に関する実験を行い、培養上清中に抗105Kgpモノクローナル抗体と反応する分子の存在をウエスタン・ブロッティング法で確認した。しかし、検出されたポリペプチドは107Kd(キロダルトン)のほか、これより小さいものが2種検出された。4.MSB1-41C移植腫瘍内の105Kgp強陽性細胞の酵素免疫組織化学的同定実験を行い、腫瘍内の強陽性部位は、腫瘍中央部の壊死部と周囲の腫瘍細胞であった。しかし、壊死部の陽性像は非特異的であることが判明したことから、腫瘍細胞による105Kgp産生が明らかとなった。5.移植鶏の腫瘍を含む各種臓器中の105Kgpの存在の有無を酵素免疫組織化学的にしらべたところ、腫瘍、脾臓および肝臓に陽性反応が認められたが、胸腺、ファブリキウス嚢、肺、腎には認められなかった。尚、陽性反応の認められた脾、肝の反応は極めて弱いものであった。6.本年度の実験からは、マクロファージによる105Kgp産生を正確に捉えることができなかった。ただ、本研究半ばに鶏マクロファージ細胞株を入手し得た。この細胞株(IN24)に対するモノクローナル抗体の作出に成功したことから、この抗体を用いて正常マクロファージを精製しIN24株と共に、105Kgp産生に関する研究を進めてゆきたい。

1. Species specificity of 105Kgp invitro cell proliferation activity was detected in 14 heterogeneic cell lines and fetal cells. 2. The two-peak amplification factor depends on the amount of 105Kgp added to the substrate. However, the 105Kgkp refined with Monokronal antibody and the different isoelectric points of the 105Kgp have been recognized, which indicates the possibility that the two-peak amplification factor will be affected by the 105Kgp. 3. MSB1 - 41C cell line 105Kgp production induction related to the conduct of culture supernatant anti-105Kgp antibody and anti-molecular presence, and its use in the detection of the presence of anti-105Kgp antibody. There are two kinds of search methods in this paper: one is 107Kd(search method), the other is 107Kd(search method). 4. Immunohistochemical staining of 105Kgp positive cells in MSB1 - 41C transplanted tumors was performed in the middle of the tumor, in the central part of the tumor, in the dead part of the tumor, and in the peripheral part of the tumor. The positive image of the tumor is not specific. 5. The presence or absence of 105Kgp in the tumor tissue of the transplant site was detected by immunohistochemical staining in the liver, thymus, spleen and kidney. The positive side of the body is the spleen, the liver is the weak side of the body. 6. This year's production of 105Kgp is correct This study was carried out on a semi-isolated cell line. This cell line (IN24) was successfully developed for the production of anti-HRP antibodies. The antibodies were purified using normal HRP antibodies. IN24 strains were used for the production of 105Kgp.

项目成果

Naoe Kotomura.: FEMS Microbiology Immunology. 47. 127-132 (1988)

Naoe Kotomura.：FEMS 微生物学免疫学。

Haruo Matsuda.: Proc. 3rd Int. Symp. Marek's Disease. (1989)

松田春夫：Proc。

Yoshio Yamamoto.: Proc. 3rd Int. Symp. Marek's Disease. (1989)

山本义雄：Proc。