鶏における腫瘍増殖関連糖蛋白質(105Kgp)産生機構解析のための基礎的研究

1.105Kgpのinvitroにおける細胞増殖活性の種特異性をしらべたところ、14種の異種細胞に対する増殖活性は認められず、鶏細胞とくに胎児細胞や鶏細胞株に対してその活性が認められた。2.培地への添加105Kgpの量に依存した2峰性の増殖パターンは、モノクローナル抗体を用いてアフィニティ精製した105Kgkpにおいても認められ等電点の異なる105Kgpが2峰性増殖パターンに影響している可能性を示唆する成績が得られた。3.MSB1-41C細胞株の105Kgp産性誘導に関する実験を行い、培養上清中に抗105Kgpモノクローナル抗体と反応する分子の存在をウエスタン・ブロッティング法で確認した。しかし、検出されたポリペプチドは107Kd(キロダルトン)のほか、これより小さいものが2種検出された。4.MSB1-41C移植腫瘍内の105Kgp強陽性細胞の酵素免疫組織化学的同定実験を行い、腫瘍内の強陽性部位は、腫瘍中央部の壊死部と周囲の腫瘍細胞であった。しかし、壊死部の陽性像は非特異的であることが判明したことから、腫瘍細胞による105Kgp産生が明らかとなった。5.移植鶏の腫瘍を含む各種臓器中の105Kgpの存在の有無を酵素免疫組織化学的にしらべたところ、腫瘍、脾臓および肝臓に陽性反応が認められたが、胸腺、ファブリキウス嚢、肺、腎には認められなかった。尚、陽性反応の認められた脾、肝の反応は極めて弱いものであった。6.本年度の実験からは、マクロファージによる105Kgp産生を正確に捉えることができなかった。ただ、本研究半ばに鶏マクロファージ細胞株を入手し得た。この細胞株(IN24)に対するモノクローナル抗体の作出に成功したことから、この抗体を用いて正常マクロファージを精製しIN24株と共に、105Kgp産生に関する研究を進めてゆきたい。

1.105Kgpのinvitroにおける細胞増殖活性の種特異性をしらべたところ、14種の異種細胞に対する増殖活性は認められず、鶏細胞とくに胎児細胞や鶏細胞株に対してその活性が認められた。2.培地への添加105Kgpの量に依存した2峰性の増殖パターンは、モノクローナル抗体を用いてアフィニティ精製した105Kgkpにおいても認められ等電点の異なる105Kgpが2峰性増殖パターンに影響している可能性を示唆する成績が得られた。3.MSB1-41C細胞株の105Kgp産性誘導に関する実験を行い、培養上清中に抗105Kgpモノクローナル抗体と反応する分子の存在をウエスタン・ブロッティング法で確認した。しかし、検出されたポリペプチドは107Kd(キロダルトン)のほか、これより小さいものが2種検出された。4.MSB1-41C移植腫瘍内の105Kgp強陽性細胞の酵素免疫組織化学的同定実験を行い、腫瘍内の強陽性部位は、腫瘍中央部の壊死部と周囲の腫瘍細胞であった。しかし、壊死部の陽性像は非特異的であることが判明したことから、腫瘍細胞による105Kgp産生が明らかとなった。5.移植鶏の腫瘍を含む各種臓器中の105Kgpの存在の有無を酵素免疫組織化学的にしらべたところ、腫瘍、脾臓および肝臓に陽性反応が認められたが、胸腺、ファブリキウス嚢、肺、腎には認められなかった。尚、陽性反応の認められた脾、肝の反応は極めて弱いものであった。6.本年度の実験からは、マクロファージによる105Kgp産生を正確に捉えることができなかった。ただ、本研究半ばに鶏マクロファージ細胞株を入手し得た。この細胞株(IN24)に対するモノクローナル抗体の作出に成功したことから、この抗体を用いて正常マクロファージを精製しIN24株と共に、105Kgp産生に関する研究を進めてゆきたい。