骨髄におけるNK細胞の分化調節機構に関する研究

骨髓NK细胞分化调控机制研究

• 批准号: 63570560
• 负责人: 依田 安弘
• 金额: $ 1.09万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570560/
• 关键词: 骨髄NK前駆細胞; サイトカイン

《目的》我々が開発した骨髄NK前駆細胞の培養法を用い、各種サイトカインが骨髄NK前駆細胞の分化に及ぼす影響を観察しNK細胞の分化調節機構を解明することを目的とした。《方法》健常人骨髄を採取し、既報の方法で成熟TおよびNK細胞を除去した後、IL2添加イスコフDMEM培地に浮遊しNK細胞を培養した。培養開始時又は開始後にrIL1、rIL3、rIL6 TNF等を各々添加し、培養細胞数を観察した。また、培養細胞をPE標識NKH1、およびFITC標識Leu11、-Leu9、-Leu7で二重染色し成熟型NK細胞率を観察した。《結果》rIL2添加培地による培養系に培養開始時からrIL1を添加し、3週間培養すると、IL1添加群では回収細胞数がやや増加した。同様にIL3添加群では著名な増加がみられた。これに対しIL6又はTNF添加群では培養細胞の回収率が低下した。これらの細胞の表面形質をフローサイトメトリーで観察すると、IL1添加群のNKH1陽性率は、対照群に比して有意差なく、IL3、IL6、TNF添加群では低下した。二重染色法によりNKH1^+Leu11^+細胞率を検索すると、IL1添加群では15〜20%増加した。IL1添加時期を1〜2週間遅らせてもNKH1^+、Leu11^+細胞率に変化はなかった。IL3、IL6、TNF添加群でLeu11^+細胞率に変わりはなかった。また、Leu9、Leu7陽性率についても各サイトカイン添加で変化なかった。《考案》IL1添加によりNKH1^+、Leu11^+すなわち成熟型NK細胞の比率が増加した。しかしその増加率が低かったことから、IL1は骨髄NK前駆細胞の分化に間接的に関与し、直接作用する別の因子が介在することが推測された。IL3はNK細胞以外の細胞を分化増殖させるものと考えられた。IL6、TNFは、NK細胞の増殖を抑制し骨髄NK細胞の分化促進作用を有する可能性は少ないように思われた。

Objective: To explore the application of culture methods for NK cells, to investigate the effects of various media on NK cell differentiation and to elucidate the regulatory mechanisms for NK cell differentiation. Methods: Healthy human bone marrow cells were cultured in DMEM medium after removal of mature T cells and NK cells. rIL1, rIL3 and rIL6 TNF were added at the beginning of culture and the number of cultured cells was observed. The percentage of mature NK cells was examined by double staining with PE markers NKH1, FITC markers Leu11, -Leu9, -Leu7. Results: The number of cells returned to the culture line with rIL2 addition increased from rIL1 addition at the beginning of culture to IL1 addition at the end of 3 weeks of culture. Same as IL3, add another name to it. In contrast, IL-6 and TNF-α decreased the recovery rate of cultured cells. The cell surface quality was significantly lower in IL-1-added group than in control group, IL-3, IL-6 and TNF-added group. The percentage of NKH1^+Leu11^+ cells detected by double staining method increased by 15 ~ 20% compared with IL1. IL-1 addition period: 1 ~ 2 weeks, the cell rate of NKH1^+ and Leu11^+ changes. IL-3, IL-6 and TNF are added to the Leu11^+ cell rate. Leu9, Leu7 positive rate is increased. The percentage of NKH1^+ and Leu11^+ mature NK cells increased with the addition of IL1. The increase rate of IL-1 was lower than that of IL-1, which was indirectly related to NK cell differentiation and directly mediated by other factors. IL-3 cell differentiation IL-6 and TNF may inhibit the proliferation of NK cells and promote the differentiation of NK cells.

项目成果

Yasuhiro,Yoda;Zenji,Kawakami;Akira,Shibuya;Tsukasa,Abe: Experimental Hematology. 16. 712-717 (1988)

Yasuhiro，Yoda；Zenji，Kawakami；Akira，Shibuya；Tsukasa，Abe：实验血液学。

Yasuhiro,Yoda;Zenji,Kawakami;Tsukasa,Abe: British Journal of Haematology. (1989)

Yasuhiro，Yoda；Zenji，Kawakami；Tsukasa，Abe：英国血液学杂志。