骨髄におけるNK細胞の分化調節機構に関する研究

《目的》我々が開発した骨髄NK前駆細胞の培養法を用い、各種サイトカインが骨髄NK前駆細胞の分化に及ぼす影響を観察しNK細胞の分化調節機構を解明することを目的とした。《方法》健常人骨髄を採取し、既報の方法で成熟TおよびNK細胞を除去した後、IL2添加イスコフDMEM培地に浮遊しNK細胞を培養した。培養開始時又は開始後にrIL1、rIL3、rIL6 TNF等を各々添加し、培養細胞数を観察した。また、培養細胞をPE標識NKH1、およびFITC標識Leu11、-Leu9、-Leu7で二重染色し成熟型NK細胞率を観察した。《結果》rIL2添加培地による培養系に培養開始時からrIL1を添加し、3週間培養すると、IL1添加群では回収細胞数がやや増加した。同様にIL3添加群では著名な増加がみられた。これに対しIL6又はTNF添加群では培養細胞の回収率が低下した。これらの細胞の表面形質をフローサイトメトリーで観察すると、IL1添加群のNKH1陽性率は、対照群に比して有意差なく、IL3、IL6、TNF添加群では低下した。二重染色法によりNKH1^+Leu11^+細胞率を検索すると、IL1添加群では15〜20%増加した。IL1添加時期を1〜2週間遅らせてもNKH1^+、Leu11^+細胞率に変化はなかった。IL3、IL6、TNF添加群でLeu11^+細胞率に変わりはなかった。また、Leu9、Leu7陽性率についても各サイトカイン添加で変化なかった。《考案》IL1添加によりNKH1^+、Leu11^+すなわち成熟型NK細胞の比率が増加した。しかしその増加率が低かったことから、IL1は骨髄NK前駆細胞の分化に間接的に関与し、直接作用する別の因子が介在することが推測された。IL3はNK細胞以外の細胞を分化増殖させるものと考えられた。IL6、TNFは、NK細胞の増殖を抑制し骨髄NK細胞の分化促進作用を有する可能性は少ないように思われた。

《目的》我々が開発した骨髄NK前駆細胞の培養法を用い、各種サイトカインが骨髄NK前駆細胞の分化に及ぼす影響を観察しNK細胞の分化調節機構を解明することを目的とした。《方法》健常人骨髄を採取し、既報の方法で成熟TおよびNK細胞を除去した後、IL2添加イスコフDMEM培地に浮遊しNK細胞を培養した。培養開始時又は開始後にrIL1、rIL3、rIL6 TNF等を各々添加し、培養細胞数を観察した。また、培養細胞をPE標識NKH1、およびFITC標識Leu11、-Leu9、-Leu7で二重染色し成熟型NK細胞率を観察した。《結果》rIL2添加培地による培養系に培養開始時からrIL1を添加し、3週間培養すると、IL1添加群では回収細胞数がやや増加した。同様にIL3添加群では著名な増加がみられた。これに対しIL6又はTNF添加群では培養細胞の回収率が低下した。これらの細胞の表面形質をフローサイトメトリーで観察すると、IL1添加群のNKH1陽性率は、対照群に比して有意差なく、IL3、IL6、TNF添加群では低下した。二重染色法によりNKH1^+Leu11^+細胞率を検索すると、IL1添加群では15〜20%増加した。IL1添加時期を1〜2週間遅らせてもNKH1^+、Leu11^+細胞率に変化はなかった。IL3、IL6、TNF添加群でLeu11^+細胞率に変わりはなかった。また、Leu9、Leu7陽性率についても各サイトカイン添加で変化なかった。《考案》IL1添加によりNKH1^+、Leu11^+すなわち成熟型NK細胞の比率が増加した。しかしその増加率が低かったことから、IL1は骨髄NK前駆細胞の分化に間接的に関与し、直接作用する別の因子が介在することが推測された。IL3はNK細胞以外の細胞を分化増殖させるものと考えられた。IL6、TNFは、NK細胞の増殖を抑制し骨髄NK細胞の分化促進作用を有する可能性は少ないように思われた。