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胎児神経系の発育分化過程におけるNerve growth Factor(NGF)の意義に関する研究

神经生长因子（NGF）在胎儿神经系统发育分化过程中的意义研究

基本信息

批准号：
63570794
负责人：
多賀理吉
金额：
$ 0.45万
依托单位：
Yokohama City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1988
资助国家：
日本
起止时间：
1988 至 1989
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63570794/
关键词：
NGF 胎児神経系 tyrosine hydroxylase mRNA NGF受容体胎児発育分化

项目摘要

昨年度までは、NGFの受容体およびtyrosine hydroxhlase活性に及ぼすNGFの作用を、ラットの神経組織(とくに神経節)において、そのontogenityに伴う変化をみながら検討した。本年度は、肝仔神経組織におけるNGFをmolecular biologyの側面から検討することを目的とした。1)NGFmRNA検出用のoligo nucleotide probeの作成。β-NGFを構成する100番目から116番目までのアミノ酸に対応する塩基配列を選択し、Applied Biosystems Model 380AのDNA合成機によりmRNAに相補的なDNAを合成し、polyacry Comid gel etectrophoresisにより精製後、〔γ-^<32>P〕ATPにて末端をラベルしてpurobeとして。2)ラット胎仔神経組織におけるmRNAのontogeny各胎令のラット胎仔の脳を摘出後直ちに液体窒素にて凍結、保存した。crystsstatにて切片作成後、in situ hyfridizationを行う予定であったが、ひと胎盤性NGFについて、まず、このprobeが有用であるか否かを予備実験的に確認することとした。ヒト胎盤にNGFが存在することはこれまでの我々の研究で確認されている。ヒト胎盤からmRNAを抽出して、Nothern blottingを施行すると、1.3kb相当の位置に濃いシグナルが認められ、NGFmRNAによるものと考えられた。したがって、このprobeを用いて、この条件設定の中で、胎仔神経組織でのNGFmRNAのNothern blottingおよびin situ hyfvidizationの実験が可能であることが判明した。3)ラット胎仔の神経節におけるNGF受容体の変化、およびtyroseine hydroxyCase活性に及ぼすNGFの影響本年度も、一部追加実験を行ったが、昨年度の結果とほぼ同様であった。

In the past year, NGF receptor and tyrosine hydroxylase activity and NGF function have been studied. This year's review of NGF molecular biology 1) Construction of oligo nucleotide probe for NGF mRNA detection.β-NGF is composed of 100 amino acids, 116 amino acids and 116 amino acids. The mRNA is complementary to DNA synthesized by Applied Biosystems Model 380A DNA synthesizer. After purification, the γ<32>-ATP terminal is purified. 2) The fetal nervous tissue mRNA ontogeny of each fetal order is frozen and preserved immediately after extraction. After crystsstat is prepared, in situ hybridization, determine whether the probe is useful or not. The existence of NGF in the placenta is confirmed by our research. The expression of NGF mRNA was detected at the 1.3 kb site. This condition is set in the fetal brain tissue and NGFmRNA is not blotted out in situ hyfvidization. 3) Changes in NGF receptor, tyrosine hydroxyCase activity and NGF effects in fetal brain tissue This year, an additional study was conducted, and the results of last year were the same.