Charakterisierung eines Heterochromatin-spezifischen Proteins aus Stylonychia und seine Bedeutung beim programmierten DNA-Abbau

柱甲异染色质特异性蛋白的表征及其在程序性 DNA 降解中的重要性

• 批准号: 5230522
• 负责人: Professor Dr. Christian Maercker
• 金额: --
• 依托单位: Hochschule Esslingen
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5230522?language=en
• 关键词: Charakterisierung; eines; Heterochromatin; spezifischen; Proteins

Das Ziel des Projekts ist die Charakterisierung von Spdd1p, einem Protein, welches in die Heterochromatisierung und den programmierten DNA-Abbau bei Stylonychia involviert ist. Zunächst wird das Spdd1p-Gen aus dem Makronukleus kloniert. Anschließend wird mittels geeigneter Computerprogramme die Struktur des Gens analysiert und nach Homologien zu anderen Genen, die für Kernproteine kodieren, gesucht. Die von Spdd1p wird in verschiedenen Differenzierungsstadien und in gehungerten Stylonychia-Zellen untersucht. Außerdem werden Expressionsplasmide kloniert, mit denen Spdd1p und Mutanten des Proteins in E.coli und eventuell auch in Stylonychia exprimiert werden können. Die aus E.coli aufgereinigten Proteine werden zur Herstellung von Antikörpern und für Bindungsstudien eingesetzt, um andere Proteine oder DNA-Sequenzen als mögliche Bindungspartner zu identifizieren. Nach Injektion von überexprimierten Proteinen, Antikörpern oder Expressionsplasmiden in Stylonychia sollen durch mikroskopische und biochemische Analysen in vivo-Funktionen von Spdd1p aufgeklärt werden.

本研究的目的是研究一种蛋白质Spdd 1 p的异染色质特性，并对涉及棘尾虫的DNA进行编程。SPDD 1 p-Gen将从Makronukleus克隆出来。Anschließend wird mittels geegneter Computerprogramme die Struktur des Gens analysiert und nach Homologien zu anderen Genen，die für Kernproteine kodieren，gesucht. Spdd 1 p的差异将被验证，并将在Stylonychia-Zellen中找到。在大肠杆菌中表达Spdd 1 p和蛋白质突变的韦尔登克隆，以及在发生韦尔登的细菌中的表达。Die aus.coli aufgereinigten Proteine韦尔登zur Herstellung von Antikörpern und für Bindungsstudien eingesetzt，um andere Proteine oder DNA-Sequenzen als mögliche Bindungspartner zu identifieren.通过对Spdd 1 p的体内微生物学分析，研究了注射外源性蛋白、抗虫剂或表达剂对柱突甲的影响。