植物トランスポゾンによる遺伝的組み換えとその制御に関する研究

植物转座子基因重组及其调控研究

• 批准号: 63580200
• 负责人: 大坪 久子
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1988
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1988 至 1989
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-63580200/
• 关键词: 植物トランスポゾン; イネ反復配列; 可動性遺伝因子; トランスポゾン; 遺伝的組み換え; 遺伝子導入; イネ染色体上反復配列

1.人工トランスポゾンの作成とイネプロトプラストへの導入Z.maysのトランスポゾンAc2,Ds9およびその誘導体をbinary vector PEND4KおよびpBIN19へ導入するステップはほぼ終了した。しかし、当初目的とした、これらのプラスミドのイネプロトプラストへの導入は筑波大学の内宮研究室と協力して行ったにもかかわらずクロ-ンを得るには至っていない。導入法としてCa++/PEG法、選択マ-カ-としてカナマイシン耐性を用いたが、イネの場合electroporationによってDNAを導入しヒグロマイシン耐性で選択する方が効率よくクロ-ンが得られることが最近判明したため今後後者の方法をとるべくvectorを改変中である。2.イネ反復配列の分離とその構成。本研究期間中、トランスポゾンとはまた異なる可動性遺伝因子であるイネの反復配列に関しても平行して研究を進めてきた。その結果を要約すると以下のようになる。イネ培養細胞および幼苗DNAをEcoRI消化することにより355bpsを単位として染色体上にタンデムに並ぶ反復配列を分離した。この配列のコピ-数は培養細胞と植物体の間では顕著な差はみられないが品種間(たとえばササニシキと日本晴)の差の方がむしろ顕著である。日本晴幼苗genomic libraryから17コピ-の連続した配列を持つEMBL3クロ-ンを分離、それらの塩基配列を決めた結果、この配列が75%の高AT含量を示す非反復配列と隣接していること、及び各配列間の塩基置換率は5ー12.5%であることがわかった。

1. Artificial ト ラ ン ス ポ ゾ ン の made と イ ネ プ ロ ト プ ラ ス ト へ の import Z.m ays の ト ラ ン ス ポ ゾ ン Ac2, Ds9 お よ び そ の inductor を binary vector PEND4K お よ び pBIN19 へ import す る ス テ ッ プ は ほ ぼ end し た. し か し, original purpose と し た, こ れ ら の プ ラ ス ミ ド の イ ネ プ ロ ト プ ラ ス ト へ の import は tsukuba university の NaGong laboratory と together し て line っ た に も か か わ ら ず ク ロ - ン を have る に は to っ て い な い. Import method と し て Ca++ / PEG, sentaku マ カ - と し て カ ナ マ イ シ ン patience を with い た が, イ ネ の occasions electroporation に よ っ て DNA を import し ヒ グ ロ マ イ シ ン patience で sentaku す る party が sharper rate よ く ク ロ - ン が have ら れ る こ と が recently.at し た た め の way in the future the latter を と る Youdaoplaceholder0 vectorを is modified to である. 2. Youdaoplaceholder0 ネ is repeatedly arranged and separated to form とそ ネ. In this study period, ト ラ ン ス ポ ゾ ン と は ま た different な る mobility heritage 伝 factor で あ る イ ネ の repeatedly with column に masato し て も parallel し を て research into め て き た. Youdaoplaceholder0 そ result を offer すると below ようになる ようになる. イ ネ culture cell お よ び seedlings DNA を EcoRI digestion す る こ と に よ り 355 BPS を 単 a と し て chromosome に タ ン デ ム に and ぶ を repeatedly with column separation し た. こ の match column の コ ピ - several は culture cell と between plant の で は 顕 the poor な は み ら れ な い が varieties (た と え ば サ サ ニ シ キ と Japan ching) poor の の party が む し ろ 顕 the で あ る. Japanese sunny seedlings genomic Library か ら 17 コ ピ - の even 続 し た match column を hold つ EMBL3 ク ロ - ン を separation, そ れ ら の salt base with column を definitely め た results, こ の を high AT 75% with column が の content in す non-recurring match column と 隣 meet し て い る こ と, and び each match between column の は 5 ー 12.5% salt base substitution rate で あ る こ と が わ か っ た.

项目成果

大坪 久子: Jpn.J.Genet. 61. 75-100 (1988)

大坪久子：Jpn.J.Genet。61. 75-100 (1988)

S.Tsuchimoto: J.Bacteriol. 170. 1461-1466 (1988)

S.Tsuchimoto：J.Bacteriol。

Ohtsubo,H.: "Highly repetitive sequences in rice plants."

Ohtsubo,H.：“水稻植物中的高度重复序列。”

C.Miyazaki.: J.Mol.Biol. 204. 331-343 (1988)

C.Miyazaki.：J.Mol.Biol。