Experimentelle und theoretische Untersuchungen zur Verteilung von nativen und entfalteten Enzymen auf wäßrige Zwei-Phasen-Systeme
水性两相体系中天然酶和未折叠酶分布的实验和理论研究
基本信息
- 批准号:5233468
- 负责人:
- 金额:--
- 依托单位:
- 依托单位国家:德国
- 项目类别:Priority Programmes
- 财政年份:1996
- 资助国家:德国
- 起止时间:1995-12-31 至 2000-12-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
Wäßrige Zwei-Phasen-Systeme entstehen bei der Lösung zweier hydrophiler, jedoch inkompatibler Stoffe (z.B. zweier Polymerer oder eines Polymeren und eines Salzes) in Wasser. Sie sind von großem Interesse für die Aufarbeitung von Enzymen. Enzyme sind häufig nur in wäßrigen Lösungen innerhalb enger Bereiche von Temperatur, pH-Wert und Ionenstärke stabil. In wäßrigen ZweiPhasen-Systemen lassen sich pH-Wert bzw. Ionenstärke durch Puffer bzw. Neutralsalze einstellen. In Anwesenheit ionischer Spezies werden in solchen Systemen Erscheinungen beobachtet, die man üblicherweise mit dem Auftreten von elektrischen Potentialdifferenzen erklärt. Solche Potentialdifferenzen beeinflussen entscheidend die Verteilung von Enzymen. In Vorarbeiten wurde eine thermodynamisch konsistente Erklärung der Ursachen von Potentialdifferenzen gegeben und eine Methode zu deren Berechnung entwickelt. Ist die (vom pH-Wert, der ebenfalls vorhergesagt werden kann, abhängige) Nettoladung eines Enzyms bekannt, so sollte damit der aus der elektrischen Potentialdifferenz resultierende Beitrag zum Verteilungskoeffizienten vorhergesagt werden können. Ziel des Vorhabens ist es, durch experimentelle und theoretische Untersuchungen diese Methode an nativen Enzymen zu überprüfen und - wenn erforderlich - weiterzuentwickeln.
Wäßrige Zwei-Phasen-Systeme entstehen bei der Lösung zweier Schweier,jedoch inkompatibler Stoffe(z.B. zweier Polymerer oder eines Polymeren und eines Salzes)在瓦塞尔。您对酶制剂很感兴趣。酶在温度、pH值和离子强度稳定的条件下具有良好的内稳定性。在第二相系统中,pH-Wert bzw。Ionenstärke durch Puffer bzw.中立派在Anwesenchionischer Spezies韦尔登在solchen Systemen Erscheinungen beobachtet,die man üblicherweise mit dem Auftreten von elektrischen Potentialdifferenzen erklärt.潜在差异影响酶的功能。在Vorarbeiten wurde一个新的consistente Erklärung Ursachen von Potentialdifferenzen gegeben和一个方法zu deren Berechnung entwickelt。由于(从pH-Wert,降低韦尔登浓度,可以抑制)酶的活性,因此,从电极电位差的结果来看,降低葡萄糖韦尔登浓度是非常重要的。这是通过实验和理论研究发现的一种天然酶促消化的方法。
项目成果
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