生物組織を分子識別素子およびキャリアとするバイオセンサ-計測システムの確立

以生物组织为分子识别元件和载体的生物传感器测量系统的建立

• 批准号: 01550582
• 负责人: 内山 俊一
• 金额: --
• 依托单位: Saitama Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01550582/
• 关键词: 分子識別素子; フロ-インジェクション法; 総ビタミンC測定; きゅうりジュ-ス; ポルホビリノ-ゲン

生物組織は多量の天然酵素を含有しており、生物組織を固定化酵素として捉えた分析法の開発を行い、下記の成果を得た。具体的には小麦はい芽を利用したポルホビリノ-ゲンセンサ-及びきゅうりジュ-スをキャリア液とする酸化型ビタミンC(デヒドロアスコルビン酸)ならびに総ビタミンCの測定法の確立である。ポルホビリノ-ゲンセンサ-は小麦はい芽からアセトン抽出したウロポルフィリノ-ゲンシンタ-ゼを固定したガラスビ-ズをアンモニア電極膜上にセルロ-ス膜で装着した構造をしている。このセンサ-の応答時間は5-10分であり、検量線の傾きは30(mV/decade)であった。この固定化酵素は約2ヵ月間安定であり、この間繰り返し測定が可能であった。また市販のきゅうりから得たジュ-スは非常に高いアスコルビン酸オキシダ-ゼ活性を有し、フロ-インジェクション法のキャリア液として用いると5x10^<-4>-1x10^<-2>MのL-アスコルビン酸が測定できた。さらに試料を注入する前にジチオスレイト-ル(DTT)を加えるとDTTが試料中に含まれる酸化型ビタミンCを還元してL-アスコルビン酸を生成させるため、結果として還元型と酸化型の和すなわち総ビタミンCが測定できることが明きらかとなった。なおデヒドロアスコルビン酸のL-アスコルビン酸への還元率は95%であり、各種果汁(キ-ウイフル-ツ、ミカン、レモン等)の総ビタミンCが極めて簡便な実験操作で1試料当り5分以内で測定出来ることがわかった。また本研究で開発した手法は新規なバイオセンサ-として有用であるとともに生物化学計測システムの新しいコンセプトを生み出した点で大変意義深いものであると考えられる。

Biological tissue は の abundant natural enzyme を contains し て お り, biological tissue を immobilized enzyme と し て catch え た analysis の open 発 を い, remember の results under を た. Specific に は wheat は い bud を using し た ポ ル ホ ビ リ ノ - ゲ ン セ ン サ - and び き ゅ う り ジ ュ - ス を キ ャ リ ア liquid と す る acidification model ビ タ ミ ン C (デ ヒ ド ロ ア ス コ ル ビ ン acid) な ら び に 総 ビ タ ミ ン C の measurement の establish で あ る. ポ ル ホ ビ リ ノ - ゲ ン セ ン サ - は wheat は い bud か ら ア セ ト ン spare し た ウ ロ ポ ル フ ィ リ ノ - ゲ ン シ ン タ - ゼ を fixed し た ガ ラ ス ビ - ズ を ア ン モ ニ ア electrode membranes に セ ル ロ - で ス membrane containing し た tectonic を し て い る. Youdaoplaceholder5 セ セ サ サ- <s:1> 応 answer time サ 5-10 minutes であ, 検 volume line <s:1> tilt <s:1> <e:1> 30(mV/decade)であった. The imactivated enzyme of <s:1> is stable for about 2ヵ months であ, and the results of <s:1> irculation between <s:1> are が possible であった. ま た city vendor の き ゅ う り か ら have た ジ ュ - ス は very high に い ア ス コ ル ビ ン acid オ キ シ ダ actiity ゼ を し, フ ロ - イ ン ジ ェ ク シ ョ ン method の キ ャ リ ア liquid と し て in い る と 5 x10 ^ x10 < - > 4-1 ^ < - > 2 M の L - ア ス コ ル ビ が ン acid determination で き た. Before さ ら に sample を injection す る に ジ チ オ ス レ イ ト - ル (DTT) を え る と DTT が に in sample contains ま れ る acidification model ビ タ ミ ン C を also yuan し て L - ア ス コ ル ビ ン acid を generated さ せ る た め, results と し て also yuan と acidification の and す な わ ち 総 ビ タ ミ ン C が determination で き る こ と が Ming き ら か と な っ た. な お デ ヒ ド ロ ア ス コ ル ビ ン acid の L - ア ス コ ル ビ ン acid へ の は yuan rate 95% で あ り, all kinds of fruit juice (キ - ウ イ フ ル ツ, ミ カ ン, レ モ ン etc) の 総 ビ タ ミ ン C が め extremely easy て な be 験 で operation 1 sample when り で determination within five points out る こ と が わ か っ た. ま た で open this study 発 し た gimmick は new rules な バ イ オ セ ン サ - と し て useful で あ る と と も に biochemistry measuring シ ス テ ム の new し い コ ン セ プ ト を raw み out し た point で big - meaning deep い も の で あ る と exam え ら れ る.

项目成果

内山俊一,鈴木周一: "Flow-injection determination of total vitamin C using Cucumber juice as carrier" Anal.Chim.Acta.

Shuunichi Uchiyama、Shuichi Suzuki：“以黄瓜汁为载体的流动注射测定总维生素 C”Anal.Chim.Acta。

内山俊一,鈴木周一,佐藤知広: "Porphobilinogen electrode using an immobilized uroporphyrinogen isomerase glass beads" Electroanalysis.

Shunichi Uchiyama、Shuichi Suzuki、Tomohiro Sato：“使用固定化尿卟啉原异构酶玻璃珠的胆色素原电极”电分析。

内山俊一: "電気化学センサ-による溶液内成分の簡易測定" 塗装工学.

Shunichi Uchiyama：“使用电化学传感器简单测量溶液中的成分”涂料工程。