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ゴルジ装置に局在する血清蛋白質前駆体のプロセッシングに関与するプロテア-ゼ

一种蛋白酶，参与位于高尔基体中的血清蛋白前体的加工。

基本信息

批准号：
01571239
负责人：
織田公光
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1989
资助国家：
日本
起止时间：
1989 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)プロペプチドに対する抗体の作成。血清アルブミンの前駆体であるプロアルブミンに対する抗体を調整するために、プロ配列(ArgーGlyーPheーValーArg)のC末端にシステインを有する合成ペプチドをオボアルブミンとカツプルさせ、家兎に免役することにより、プロアルブミンを特異的に認識する抗体を得た。さらに固定化抗体を利用したアフィニィティ-クロマトグラフィ-によりミクロゾ-ム分画より一段階でプロアルブミンを精製することが可能になった(論文1)。このプロアルブミンに対する抗体と、成熟アルブミンに対する抗体を使って、プロアルブミン→血清型アルブミンへの変換部位の固定を金コロイド/電顕を用いて検討している。2)COS細胞でのラットアルブミン遺伝子の発言。COS細胞はSV40由来のベクタ-に組み込まれた外来遺伝子を効率よく発言することが知られている。そこで、ラットアルブミンのCDVAをPSV_2ベクタ-に組み込んで発現させ、その生合成およびプロセシングの検討を行った。エレクトロポレ-ション法により遺伝子を導入したところ、アルブミンがCOS細胞で非常によく発現させることが、イ)放射性メチオニンによる標識実験およびロ)酵素抗体法を用いた組織科学的方法により確認された。さらに、分泌されたアルブミンの半分は血清アルブミンであり、COS細胞内でプロアルブミンは効率よくプロセッシングを受けることが明らかとなった(論文2)。一方、COS細胞で発現させたプロインシュリンやプロオピオメラノコルチンはそれぞれインシュリン、ACTHへは変換されないという報告があり、COS細胞に存在するプロテア-ゼはプロアルブミンの変換に特異的である可能性が示唆された。

1) Preparation of antibodies for the treatment of diseases. The antibody is regulated by the precursor of the serum protein, and the antibody is regulated by the protein sequence (Arg Gly-Phe Val). The antibody is synthesized by the protein sequence (Arg Gly-Phe Val Arg). Immobilized antibodies can be purified in a single stage by using immobilized antibodies (Paper 1). The antibody, mature antibody, antibody, serotype, serotype antibody, serotype, serotype, serotype antibody, serotype, serotype 2)COS cells are the first cells to express their genes. COS cell SV40 is derived from a foreign gene. The CDVA of the system is PSV_2, and the system is developed and synthesized. The enzyme antibody method was used to confirm the gene introduction into COS cells using tissue science methods. In addition, in COS cells, the expression of anti-inflammatory and anti-inflammatory genes was detected.(Paper 2) On the other hand, COS cells can be found in different ways, such as in different types of cells, and ACTH can be found in different types of cells.