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ゴルジ装置に局在するプロアルブミンの変換酵素について

关于位于高尔基体的白蛋白原转换酶

基本信息

批准号：
02671044
负责人：
織田公光
金额：
$ 0.51万
依托单位：
Fukuoka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1)プロアルブミンのプロペプチドに対する抗体を調製し、その性格付けを行った(論文1)。プロペプチドに対する抗体は成熟型である血清アルブミンとは全く反応せず、プロアルブミンに特異的であることを明らかにした。また、本抗体を用いたイムノアフィニティ-クロマトグラフィ-によりプロアルブミンを簡便に精製する方法を報告した。さらに、ラット肝細胞を用いてのアルブミンの生合成とそのプロセシングに本抗体が有用であることを示した。2)ラット肝のcDNAライブラリ-よりα_1ープロテア-ゼインヒビタ-(α_1ーPI)のクロ-ニングを行ってその全アミノ酸配列を明らかにし,さらにCOSー1細胞にトランスフェクトすることによりその発現を確認した(論文2)。3)上述したα_1ーPIの352番目のメチオニンを部分特異的突然変異法によりアルギニンに変換し(Var M→A)、COSー1細胞で発現させた.またVarM→Aとプロアルブミンの遺伝子をCOSー1細胞にトランスフェクトすることにより、Var(M→A)がプロアルブミンのプロセシングを著明に阻害すること、一方α_1ーPI自身はプロセシングに何ら影響しないことを報告した(論文3)。4)プロアルブミンの切断部位の配列はArgーArg〓Gluからなっているが、グルタミン酸残基を部位特異的突然変異法を用いて他のアミノ酸に変換し、プロセシングへの影響を検討したところ、疎水性のアノミ酸に置換するとプロセシングが著明に阻害されることを見い出した(論文4)。

1) Antibodies are modulated and their personalities are regulated in the presence of anti-inflammatory agents (Paper 1). It has become clear that the antibodies against prolactin are serum albumin in the mature form and are completely resistant and specific to prolactin. This paper reports a simple method for purification of the antibody. This antibody is useful in the production and synthesis of human liver cells. 2) To clarify the sequence of all kinds of amino acids in the genome of COS-1 cell, we confirm the occurrence of this gene in the genome of COS-1 cell (Article 2). 3)The above-mentioned α_1-PI 352-point transition was observed in COS-1 cells by A partially specific abrupt transition method. The influence of Var(M→A) on the cell cycle of COS-1 is reported (Thesis 3). 4) A site-specific mutation method was used to investigate the effect of acid substitution on the cleavage site of the protein by Arg, Glu and Glu (Paper 4).